Unterschied zwischen BL21 und DH5 Alpha

Der Schlüsselunterschied Zwischen BL21 und DH5 Alpha ist, dass BL21 eine proteasemangelhafte gentechnisch veränderte kompetent ist E. coli Zelle, die hauptsächlich für die Proteinexpression verwendet wird, während DH5 Alpha ein gentechnisch veränderter kompetent ist E. coli Zelle mit Reca1 -Mutation, die hauptsächlich für die Plasmidtransformation verwendet wird.

E. coli ist einer der berühmten Organismen der Wahl für die rekombinante Proteinproduktion. Es ist im Laufe der Jahre die beliebteste Ausdrucksplattform geworden. Es wird auch als Zellfabrik verwendet. BL21 und DH5 Alpha sind zwei gentechnisch veränderte E. coli Zellen, die derzeit für die Proteinexpression und die Plasmidtransformation verwendet werden.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist BL21  
3. Was ist DH5 Alpha
4. Ähnlichkeiten - BL21 und DH5 Alpha
5. BL21 gegen DH5 Alpha in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung - BL21 gegen DH5 Alpha

Was ist BL21?

BL21 ist eine proteasemangelhafte gentechnisch veränderte kompetent E .coli Zelle, die hauptsächlich für die Proteinexpression verwendet wird. E. coli BL21 ist eine Bakterienzelle, die vom B -Stamm abgeleitet ist. Es hat Defekte der Lon -Protease und der OMPT -Außenmembranprotease. Es wird üblicherweise für die rekombinante Proteinexpression verwendet. BL21 ist nützlich für die Proteinexpression mit PCOLD I-IV-DNA und PCOLD TF-DNA. Aber dieser kompetent E. coli Die Zelle ist für ein Proteinexpressionssystem unter Verwendung von T7 -Promotor wie dem PET -System nicht bestimmt. Der Grund dafür ist, dass BL21 T7 RNA -Polymerase nicht exprimiert. Zusätzlich wird nicht empfohlen, die Konstruktion oder Herstellung von Plasmid zu verwenden, da es keine RecA -Mutation aufweist.

Abbildung 01: BL21

BL21 wurde erstmals 1986 nach verschiedenen Modifikationen der B -Linie durch Studier beschrieben. BL21 -Zellen haben die LON -Protease, die viele Fremdproteine ​​beeinträchtigt. Darüber hinaus fehlt ein anderes Gen, das für die Außenmembranprotease (OMPT) kodiert, deren Funktion es ist, extrazelluläre Proteine ​​abzubauen. Ein Mangel an diesen Proteinen löst die erfolgreiche Produktion von Fremdprotein in aus E. coli BL21 -Zellen. Darüber hinaus verhindert die HSDSB -Mutation in diesen Zellen fremde DNA -Methylierung und Störung in den BL21 -Zellen.

Was ist DH5 Alpha?

DH5 Alpha ist eine gentechnisch veränderte kompetent E. coli Zelle mit Reca1 -Mutation, die hauptsächlich für die Plasmidtransformation verwendet wird. DH5 Alpha E. coli Zellen werden vom amerikanischen Biologen Douglas Hanahan gentechnisch verändert, um die Effizienz der Transformation zu maximieren. Die DH5 -Alpha -Zelle hat drei verschiedene Mutationen: Reca1, Enda1 und Laczδm15. reca1 ist eine einzelne Punktmutation, die Glycin 160 durch und einen Asparaginsäurer Rest im RecA -Polypeptid ersetzt. Diese Mutation deaktiviert die Aktivität der Rekombinasen und inaktiviert homologe Rekombination. Die Enda1 -Mutation inaktiviert eine intrazelluläre Endonuklease, die verhindert.

Abbildung 02: DH5 Alpha

Darüber hinaus ermöglicht die LacZδM15-Mutation das blau-weiße Screening transformierter Zellen. Diese Zellen sind kompetente Zellen. Sie werden häufig mit Calciumchloridtransformation verwendet, um das gewünschte Plasmid einzufügen. Die jüngsten Untersuchungen wurde identifiziert, dass die DH5 -Alpha -Zelle mit der Hanahan -Methode die effizienteste kompetente Zelle für die Plasmidtransformation war.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen BL21 und DH5 Alpha?

• BL21 und DH5 Alpha sind zwei gentechnisch veränderte E .coli
• Beide sind kompetente Zellen.
• Sie bestehen aus unterschiedlichen Mutationen.
• Beide haben keinen natürlichen Lebensraum.
• Diese werden für Laborzwecke wie Expressionsstudien und Klonierungsverfahren verwendet.

Was ist der Unterschied zwischen BL21 und DH5 Alpha?

BL21 ist eine proteasemangelhafte gentechnisch veränderte kompetent E. coli Zelle, die hauptsächlich für die Proteinexpression verwendet wird. Andererseits ist DH5 Alpha ein gentechnisch veränderter kompetenter E. coli Zelle mit Reca1 -Mutation, die hauptsächlich zur Plasmidtransformation verwendet wird. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen BL21 und DH5 Alpha. Darüber hinaus, BL21 E. coli Zelle hat keine Reca1 -Mutation, während DH5 Alpha E. coli Zelle hat eine Reca1 -Mutation.

Die folgende Infografik listet die Unterschiede zwischen BL21 und DH5 Alpha in tabellarischer Form auf.

Zusammenfassung -BL21 gegen DH5 Alpha

Die nicht pathogenen Stämme von E. coli werden von Wissenschaftlern genetisch für Laborexpressionsstudien und Klonierungszwecke entwickelt. BL21 und DH5 Alpha sind zwei gentechnisch veränderte E. coli Zellen. BL21 wird hauptsächlich für Proteinexpressionsstudien verwendet. Andererseits wird DH5 Alpha hauptsächlich für Plasmid -Transformationszwecke verwendet. Dies ist also die Zusammenfassung des Unterschieds zwischen BL21 und DH5 Alpha.

Referenz:

1. „BL21 kompetent e. Coli.New England Biolabs: Reagenzien für die Biowissenschaftsbranche.
2. „DH5-Alpha Chemisch kompetent e. Coli -Zellen.”Goldbio.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. „Analyse der Human-Cytomegalovirus-kodierten Sumo-Targets-Temporal-Regulierung der Sumylierung des T-Targets.0103308.G001 ”von Kim E, Kim Y., Kim Y, Lee M, Hayward G, Ahn J-“ Analyse menschlicher Zytomegalovirus-kodierter Sumo-Ziele und zeitlicher Regulation der Sumoylierung der sofortigen Early-Proteine ​​IE1 und IE2 während der Infektio “PLOS ONE. Doi: 10.1371/Journal.Pone.0103308. PMID 25050850. PMC: 4106884 (CC von 4.0) über Commons Wikimedia
2. "DH5-Alpha-Kolonien, die auf einer Amp-Platte wachsen" von Balapagos (CC BY-SA 2.0) über Flickr