Unterschied zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung

Der Schlüsselunterschied Zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung befindet sich das Chromatofokusion ist eine Art von Säulenchromatographie -Methode, die Ionenaustauschharze verwendet, während die isoelektrische Fokussierung eine Art von Elektrophorese -Technik ist, die immobilisierte pH -Gradientengele verwendet.

Chromatofokusion und isoelektrische Fokussierung sind zwei Techniken, die Proteine ​​nach ihren isoelektrischen Punkten trennen. Sowohl Chromatofokusion als auch isoelektrische Fokussierung haben eine große Auflösungskraft. Chromatofokusion ist eine hochauflösende Säulenchromatographie-Methode, während die isoelektrische Fokussierung eine elektrophoretische Trennmethode ist. Darüber hinaus verwendet Chromatofokusion kein elektrisches Feld, während die isoelektrische Fokussierung ein elektrisches Feld benötigt.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Chromatofokusion 
3. Was ist isoelektrische Fokussierung
4. Ähnlichkeiten zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung
5. Seite für Seitenvergleich - Chromatofokusion gegen isoelektrische Fokussierung in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Chromatofokusion?

Chromatofokusion ist eine Art hoher Elutionschromatographie, die Proteine ​​nach Unterschieden in ihrem isoelektrischen Punkt trennt. Es verwendet eine Ionenaustauschharzsäule und einen intern entwickelten pH -Gradienten. Im Gegensatz zur isoelektrischen Fokussierung beinhaltet Chromatofokusion kein elektrisches Feld. Chromatofocusing ist eine leistungsstarke Reinigungstechnik, die sehr ähnliche Moleküle auch nur um 0 unterscheidet.02 pH -Einheiten. Daher eignet sich das Chromatofokus.

Bei Chromatofokusion wird die Probe auf die Säule angewendet, indem sie mit dem Startpuffer gemischt wird. Proteine, die sich an einem pH -Wert über ihrem isoelektrischen Punkt befinden. Das Protein mit dem höchsten isoelektrischen Punkt ist zuerst eluiert, während das Protein mit dem niedrigsten isoelektrischen Punkt zuletzt aus der Säule eluiert ist. Diese Technik wird von mehreren Faktoren wie Proteinniederschlag und Linearität des pH -Wertgradienten beeinflusst.

Was ist isoelektrische Fokussierung?

Die isoelektrische Fokussierung ist eine Technik, die verschiedene Moleküle basierend auf ihrem isoelektrischen Punkt trennt. Es ist auch als Elektrofokusse bekannt. Diese Technik wird häufig zur Proteintrennung in einem Gel verwendet. Bei der isoelektrischen Fokussierung wird die Probe in IPG -Gele (Immobilisierter pH -Gradienten) hinzugefügt. IPG -Gel ist eine Acrylamid -Gel -Matrixmatrix, die mit einem pH -Gradienten copolymerisiert ist. Die Proteine ​​wandern in Richtung der Kathode, bis sie den pH -Bereich ihrer isoelektrischen Punkte finden. Wenn ein Protein den pH -Wert erreicht, der keine Nettoladung hat, hört die Migration auf und gibt ein stationäres Band. Ebenso gibt jedes Protein eine Bande an einem Punkt im pH -Gradienten, der seinem isoelektrischen Punkt entspricht.

Abbildung 01: isoelektrische Fokussierung

Die isoelektrische Fokussierung ist der erste Schritt der zweidimensionalen Gelelektrophorese. In dieser Technik werden Proteine ​​zuerst nach ihren isoelektrischen Punkten durch isoelektrische Fokussierung getrennt und dann durch ihr Molekulargewicht durch SDS-PAGE getrennt.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung?

• Chromatofokusion und isoelektrische Fokussierung sind zwei hochlösende Methoden.
• Beide basieren auf dem isoelektrischen Punkt von Proteinen.
• Diese Techniken verwenden einen pH -Gradienten.
• Beide Verfahren sind informativ für die Charakterisierung menschlicher Hämoglobinvarianten.
• Sie können Moleküle auflösen, bei denen sich die PI -Werte um nur 0 unterscheiden.02 pH -Einheiten.

Was ist der Unterschied zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung?

Chromatofokusion ist eine hochauflösende Säulenchromatographie-Technik, die Proteine ​​nach ihrem isoelektrischen Punkt trennt. Im Gegensatz dazu ist die isoelektrische Fokussierung eine elektrophoretische Technik, die Proteine ​​entsprechend ihrem isoelektrischen Punkt durch Anwendung eines elektrischen Feldes entlang eines in einer Kapillare gebildeten pH -Gradienten trennt. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung.

Ein weiterer Unterschied zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung besteht darin, dass das Chromatofokus.

Zusammenfassung -Chromatofokusion gegen isoelektrische Fokussierung

Chromatofokusions- und isoelektrische Fokussierung sind zwei ähnliche Techniken, die eine hohe Auflösungsfähigkeit von Molekülen haben, insbesondere sehr ähnliche Moleküle. Chromatofokusion ist eine hochauflösende Säulenchromatographie-Technik, während die isoelektrische Fokussierung eine Elektrophorese-Methode ist. Das Chromatofokusen beinhaltet im Gegensatz zur isoelektrischen Fokussierung kein elektrisches Feld. Dies fasst den Unterschied zwischen Chromatofokusion und isoelektrischer Fokussierung zusammen.

Referenz:

1. „Chromatofokusion: Prinzipien und Methoden.”Sigma, hier erhältlich.
2. "Isoelektrische Fokussierung". En.Wikipedia.Org, 2020, hier erhältlich.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Isoelektrische Fokussierung beitragen2" von MRBEAN427 - eigene Arbeit (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia