Unterschied zwischen GFP und EGFP

Der Schlüsselunterschied zwischen GFP und EGFP ist, dass die GFP ist Ein Wildtyp-Protein, das in das molekulare Klonieren von Nicht-Säugetierzellen eingebaut ist, während das EGFP eine verbesserte oder technische GFP-Art ist, die auf Säugetierzellen verwendet werden kann.

Das molekulare Kloning ist eine fortschrittliche Technik, die Wissenschaftler immens beim Expression von Proteinen über rekombinante Technologie einsetzen. In der rekombinanten DNA -Technologie ist es notwendig, den rekombinanten Vektor erfolgreich in den Wirt Organismus zu verwandeln.  Daher sollte während des Transformationsprozesses identifiziert und bestätigt werden, ob das interessierende Gen in den Wirt umgewandelt wurde oder nicht. Um dies zu beurteilen, verwenden molekulare Biologen verschiedene Techniken. Aus diesen Techniken ist man ein Reportergen. Diese Reportergene wirken als wählbare Markierungen, um die richtigen Transformanten auszuwählen. Somit sind das grün fluoreszierende Protein (GFP) und das verstärkte grün fluoreszierende Protein (EGFP) zwei Reporterproteine, die bei der molekularen Klonierung verwendet werden.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist GFP
3. Was ist EGFP
4. Ähnlichkeiten zwischen GFP und EGFP
5. Seite für Seitenvergleich - GFP vs EGFP in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist GFP?

GFP ist ein Wildtyp-Protein, das 238 Aminosäurereste und mehrere ausgewählbare Regionen von Aminosäuresequenzen enthält, die es von den anderen fluoreszierenden Proteinen unterscheiden. Darüber hinaus wurde dieses Wildtyp-Protein ursprünglich isoliert von isoliert Aequorea Victoria; eine Art Quallen. In natürlichen Phänomenen konnte die Quallen jedoch als Reaktion auf bestimmte Reize grüne Farbfluoreszenz erzeugen.

Früher überraschte dieses Konzept die Wissenschaftler und sie beschlossen, es für ihre rekombinanten DNA -Technologien zu verwenden. Folglich verwendeten Wissenschaftler diese mutierte Form des Wildtyp-Gens als Reportergen in ihren Genexpressionsstudien. Das Wildtyp-Gen von GFP kann ein Protein produzieren, das Fluoreszenz bei Raumtemperatur oder unter UV-Licht verleiht. Daher drückt und erzeugt es, wenn es in die Transformanten eingeführt wird, Fluoreszenz. Wenn die Fluoreszenz nach dem Transformationsprozess entsteht, bestätigt sie den Erfolg des Transformationsprozesses. In einfachen Worten signalisiert die Fluoreszenzemission die erfolgreiche Transformation des Vektors, die das interessierende Gen in den Wirt trägt.

Abbildung 01: GFP

Aus diesem Grund wirkt die GFP als eine In vivo Marker der Genexpression. Gegenwärtig werden Gentechniken zur Herstellung von GFP verwendet. Außerdem sind viele verbesserte Versionen von GFP wie EGFP verfügbar. Dies ermöglicht daher eine effiziente Verwendung des GFP in molekularen Klonierung und Genexpressionsstudien.

Was ist EGFP?

Verbessertes grün fluoreszierendes Protein oder EGFP ist eine verbesserte Version von GFP. In einfachen Worten können wir EGFP als eine technische Version der Wildtyp-GFP definieren. Wenn das Wildtyp-Gen von GFP mutiert, erzeugt es vorteilhafte Wirkungen. Daher ermöglicht das mutierte Gen von GFP die Expression neuer Zeichen, und als Ergebnis können wir verbesserte GFP mit verbesserten Eigenschaften erzeugen. Darüber hinaus können wir mit Bestrahlung oder chemischen Methoden Mutationen erfolgreich in das Wildtyp-GFP-Gen einführen. Diese mutierten Gene produzieren dann das EGFP, das vorteilhaftere Eigenschaften aufweist.

Abbildung 02: EGFP

Die verbesserten Eigenschaften von EGFP sind wie folgt;

• In der Lage, stärkere Fluoreszenzsignale abzugeben.
• Hat eine hohe Empfindlichkeit.
• Kann es auf Säugetierzellen anstelle von Prokaryoten und anderen Eukaryoten auf niedrigerer Ebene verwenden.
• Bietet auch eine erhöhte Reinheit des Produkts.

Daher ist EGFP im Vergleich zu GFP die bevorzugte Wahl für Genexpressionsstudien. Das Produkt ist jedoch teurer im Vergleich zu GFP.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen GFP und EGFP?

• GFP und EGFP sind zwei Proteine ​​mit der Fähigkeit, grüne Farbe zu emittieren
• Daher fungieren beide als Reporterproteine ​​in Genexpressionsstudien.
• Außerdem ist es möglich, beide mit rekombinanter DNA -Technologie zu synthetisieren.
• Darüber hinaus ist es einfach, diese beiden Typen weiter zu mutieren, um verbesserte Formen zu synthetisieren.

Was ist der Unterschied zwischen GFP und EGFP?

Das Reportergen ist ein Gen, das sich mit dem interessierenden Gen an rekombinante DNA -Technologie befasst. Es signalisiert die erfolgreiche Transformation des rekombinanten Vektors in den Wirt. Hier sind GFP und EGFP zwei Arten von grünen floreszierenden Proteinen, die als Reporterproteine ​​fungieren. Der Hauptunterschied zwischen GFP und EGFP besteht jedoch darin, dass die GFP ein Wildtyp ist, während EGFP eine technische Version von GFP ist. Darüber hinaus hat EGFP mehr vorteilhafte Eigenschaften als GFP. Zum Beispiel erzeugt EGFP ein stärkeres fluoreszierendes Licht und ist empfindlicher als die GFP. Ein weiterer Unterschied zwischen GFP und EGFP sind die Systeme, in denen wir diese verwenden können. Nicht-Säugetier-Systeme verwenden GFP, während Säugetiersysteme EGFP verwenden.

Die folgende Infografik zeigt den Unterschied zwischen GFP und EGFP in tabellarischer Form.

Zusammenfassung -GFP vs EGFP

GFP und EGFP sind Reporterproteine ​​in molekularen Klonierung und Genexpressionsstudien. GFP ist das Wildtyp-Protein, das ein grünes fluoreszierendes Protein ist. Das Protein war anfangs isoliert von der Quallen Aequorea Victoria. Im Gegensatz dazu ist EFGP eine verstärkte Form des GFP -Proteins. Es ist eine Mutante des Wildtyps mit verbesserten Eigenschaften. Daher hat EFGP die höhere Signalstärke und höhere Empfindlichkeit. Daher können wir es auf Säugetiervektoren verwenden. Im Gegensatz dazu erfolgt die Verwendung von GFP hauptsächlich nur bei Nicht -Säugetier -Vektoren. Dies ist der Unterschied zwischen GFP und EGFP.

Referenz:

1.Cinelli, R A, et al. „Das verstärkte grün fluoreszierende Protein als Werkzeug zur Analyse der Proteindynamik und Lokalisierung: Lokale Fluoreszenzstudie auf Einzelmolekülenebene.Photochemie und Photobiologie., U.S. National Library of Medicine, Juni 2000. Hier verfügbar  
2.„PDB101: Molekül des Monats: grün fluoreszierendes Protein (GFP).”RCSB: PDB-101. Hier verfügbar

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1."GFP Fluoreszenzprotein Film" von Erin Rod - eigene Arbeit (CC BY -SA 4).0) über Commons Wikimedia 
2.”Ca2 Amigo2 EGFP -Maus“ von Dudek, Serena; Curuana, Douglas; Carstens, Kelly - eigene Arbeit, (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia