Was ist der Unterschied zwischen Immunpräzipitation und Koimmunpräzipitation

Der Schlüsselunterschied zwischen Immunpräzipitation und Koimmunopräzipitation ist, dass die Immunpräzipitation eine Technik ist, die ein Protein aus der Lösung unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers ausfällt, während die Koimmunopräzipitation eine Technik ist, die intakte Proteinkomplexe aus der Lösung unter Verwendung eines bestimmten Antikörpers ausfällt.

Die Antigen-Antikörper-Wechselwirkung ist eine spezifische chemische Wechselwirkung zwischen Antikörpern, die durch B-Zellen und Antigene (Proteine) während einer Immunreaktion produziert werden. Normalerweise verbinden sich lösliche Antigene mit löslichen Antikörpern in Gegenwart eines Elektrolyten bei löslicher Temperatur und pH, um einen unlöslichen sichtbaren Komplex zu machen. Dies wird als Niederschlagsreaktion bezeichnet. Daher sind Immunopräzipitation und Koimmunopräzipitation zwei Arten von Niederschlagsreaktionen, die in Labors routinemäßig verwendet werden, um Proteine ​​wie Antigene zu identifizieren.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Immunopräzipitation 
3. Was ist Coimmunopräzipitation
4. Ähnlichkeiten - Immunopräzipitation und Koimmunopräzipitation
5. Immunopräzipitation gegen Koimmunopräzipitation in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung - Immunopräzipitation gegen Coimmunopräzipitation

Was ist Immunopräzipitation?

Immunopräzipitation ist eine Technik, ein Protein aus einer Lösung unter Verwendung eines bestimmten Antikörpers auszurüsten. Manchmal wird diese Technik auch als individuelle Protein -Immunpräzipitation bezeichnet. Immunopräzipitation verwendet einen Antikörper, um ein ausgewähltes interessierendes Protein aus Zelllysat zu isolieren. Der Antikörper reinigt sein spezifisches Zielprotein oder Antigen aus einer Mischung. Der Antikörper bindet an das Protein, und der Antikörper-Antigen-Komplex wird aus der Probe herausgezogen. Im experimentellen Setup wird der Antigen-Antikörperkomplex unter Verwendung von Protein A/G-gekoppelten Agarose oder Magnetkügelchen herausgezogen. Später werden die Perlen gewaschen und das interessierende Protein ist eluiert. Das durch Immunpräzipitation erhaltene gereinigte Protein oder Antigen wird durch eine Vielzahl von Techniken wie enzymgebundenem Immunosorbent-Assay (ELISA) und Western Blot (WB) verifiziert.

Abbildung 01: Immunopräzipitation

Darüber hinaus können isolierte Proteine ​​oder Antigene durch Massenspektrometrie unter Verwendung enzymatischer Verdauungsmuster basierend auf der Primärsequenz quantifiziert und identifiziert werden. Es gibt bestimmte Überlegungen, bevor ein Immunpräzipitationsexperiment gestartet wird: Auswahl der Methodenformat, Bindungsproteine ​​und Perlen, Auswahl des richtigen primären Antikörpers und Isotyps sowie negative Kontrolle.

Was ist Coimmunopräzipitation?

Coimmunopräzipitation ist eine Technik, intakte Proteinkomplexe aus der Lösung unter Verwendung eines bestimmten Antikörpers auszusetzen. Coimmunopräzipitation funktioniert im Allgemeinen, indem sie einen spezifischen Antikörper auswählt, der auf ein bekanntes Protein (Antigen) abzielt, das als Mitglied eines größeren Proteinkomplexes angesehen wird. Durch die Ausrichtung des bekannten Mitglieds mit einem bestimmten Antikörper ist es möglich, den gesamten Proteinkomplex aus der Lösung herauszuholen. Dies ermöglicht die Identifizierung der unbekannten Mitglieder des Komplexes. Das Konzept, Proteinkomplexe aus der Lösung herauszuziehen, wird manchmal als „Pulldown“ -Mechanismus bezeichnet.

Abbildung 02: B Coimmunopräzipitation

Coimmunopräzipitation ist eine leistungsstarke Technik, mit der Protein-Protein-Wechselwirkungen analysiert werden. Der Hauptzweck der Koimmunopräzipitation ist die Identifizierung von Interaktionspartnern wie Liganden, Cofaktoren oder Signalmolekülen für das interessierende Protein. Darüber hinaus ist Coimmunopräzipitation eine wirksame Technik, mit der Proteine ​​von Serum, Zelllysat, homogenisiertem Gewebe oder konditionierter Medien getrennt werden.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Immunpräzipitation und Koimmunpräzipitation?

• Immunopräzipitation und Koimmunopräzipitation sind zwei Arten von Niederschlagsreaktionsbasis-Techniken.
• Beide Techniken können verwendet werden, um das Zielantigen durch einen bestimmten Antikörper zu identifizieren.
• Beide Techniken hängen stark von der Interaktion zwischen Antigen-Antikörper ab.
• Sie werden routinemäßig in klinischen Labors eingesetzt.

Was ist der Unterschied zwischen Immunpräzipitation und Koimmunpräzipitation?

Immunopräzipitation ist eine Technik, die ein Protein aus der Lösung unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers ausfällt, während die Koimmunopräzipitation eine Technik ist, die intakte Proteinkomplexe aus der Lösung unter Verwendung eines bestimmten Antikörpers ausfällt. Dies ist daher der Schlüsselunterschied zwischen Immunpräzipitation und Koimmunopräzipitation. Darüber hinaus wird die Immunpräzipitation häufiger in Labors verwendet, während die Koimmunopräzipitation in Labors nicht häufig verwendet wird.

Die folgende Infografik zeigt die Unterschiede zwischen Immunpräzipitation und Koimmunopräzipitation in tabellarischer Form für Seite für Seitenvergleich.

Zusammenfassung -Immunopräzipitation gegen Coimmunopräzipitation

Immunopräzipitation und Koimmunopräzipitation sind zwei Arten von Niederschlagsreaktionsbasis, die von der Antigen-Antikörper-Wechselwirkung abhängen. Die Immunopräzipitationstechnik schlägt ein Protein aus der Lösung unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers aus, während die Coimmunopräzipitationstechnik unter Verwendung eines spezifischen Antikörpers aus der Lösung aus der Lösung ausfällt. Dies fasst den Unterschied zwischen Immunpräzipitation und Koimmunpräzipitation zusammen.

Referenz:

1. „Überblick über die IP -Technik (Immunoprecipitation).”Thermo Fisher Scientific - USA.
2. „Das Prinzip und die Methode der Co-Immunopräzipitation (Co-IP).Das Prinzip und die Methode der Co-Immunopräzipitation (Co-IP) | MBL Life Sience -asia-.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Immunopräzipitation" von Itayba bei Hebräisch Wikipedia (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. "20110113-Co-Immunopräzipitation" von dtabb73-eigene Arbeit (CC0) über Commons Wikimedia