Unterschied zwischen Bradford und Lowry Protein Assay

Der Schlüsselunterschied Zwischen Bradford und Lowry Protein Assay ist das Der Bradford-Protein-Assay basiert auf der Absorptionsverschiebung des Farbstoff Coomassie Brilliant Blue G-250, während der Lowry-Protein-Assay auf der Reaktion von Kupferionen (Cu+) -Ionen basiert.

Ein Assay ist eine analytische Technik, die dazu beiträgt, die wichtigsten funktionellen Komponenten einer Probe zu charakterisieren. Daher könnte ein Assay entweder ein qualitativer oder quantitativer Test sein. Viele Bereiche, einschließlich Labormedizin, Pharmakologie, Umweltbiologie, Molekularbiologie, Biochemie und Immunologie, verwenden diese Art von Assays routinemäßig. Bradford und Lowry Protein Assay sind zwei biochemische Tests, die die Proteinkonzentration in einer Probenlösung bestimmen. Beide Assays verwenden kolorimetrische Techniken, um Ergebnisse zu erzielen.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Bradford Protein Assay
3. Was ist Lowry Protein -Assay
4. Ähnlichkeiten zwischen Bradford und Lowry Protein Assay
5. Seite an Seite Vergleich - Bradford gegen Lowry Protein -Assay in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Bradford Protein Assay?

Der Bradford -Protein -Assay ist ein schnell spektroskopisches analytisches Verfahren für die Proteinanalyse. Es zeigt eine hohe Genauigkeit bei der Messung der Proteinkonzentration in einer Lösung. Marion Bradford stellte dieses Verfahren 1976 vor. In diesem Assay basiert die Gesamtreaktion auf der Aminosäurezusammensetzung der gemessenen Proteine. In anderer Hinsicht ist Bradford Protein Assay ein kolorimetrischer Assay. Es verwendet den Farbstoff Coomassie Brilliant Blue. Daher hängt dieser kolorimetrische Protein -Assay von der Absorptionsverschiebung des Farbstoffs ab. Coomassie Brilliant Blue G-250 existiert in drei Formaten: kationisch (rot), anionisch (blau) und neutral (grün). Unter sauren Bedingungen wird die rote Form des Farbstoffs in Blau umgewandelt. Es bestätigt die Bindung des Proteins. Wenn das Protein nicht vorhanden ist, kann die Lösung in brauner Farbe bleiben.

Abbildung 01: Bradford Protein -Assay

Der Bradford -Protein -Assay unterscheidet sich von anderen Protein -Assays, da er weniger anfällig für Störungen verschiedener chemischer Verbindungen ist,. Diese Verbindungen umfassen Natrium, Kalium, Glukose und Saccharose usw.

Was ist Lowry Protein -Assay?

Lowry -Protein -Assay ist ein biochemischer Assay, der verwendet wird, um den Gesamtproteinniveau in einer Lösung zu bestimmen. Oliver h. Lowry ist die Person, die dieses Reagenz 1940 entwickelt hat. Das Verfahren zeigt die Gesamtproteinkonzentration der Lösung durch eine Farbänderung, die proportional zur Proteinkonzentration in der Lösung ist. Daher ist dies auch ein kolorimetrischer Protein -Assay.

Die Reaktion zwischen Kupferionen (Cu+), die durch die Oxidation von Peptidbindungen und das Folin-CiocalteU-Reagenz erzeugt wird, ist die Grundlage für dieses Verfahren. Außerdem enthält dieses Reagenz Phosphomolybdinsäure und Phosphor-Tangstinsäure. Der Reaktionsmechanismus des Lowry -Protein -Assays ist jedoch nicht gut bekannt. Aber es beinhaltet die Oxidation von Cystein-, Tryptophan- und Tyrosinresten durch die Verringerung des Folin-Ciocalteu-Reagens.

Abbildung 02: Lowry Protein -Assay

Die Cysteinreste tragen zur Absorption bei, die im Lowry -Protein -Assay beobachtet wurde, und die Reaktion führt zu einem brillanten blauen Molekül; Heteropoly Molybdän blau. Die Verringerung dieses Moleküls wird durch Absorption bei 660 nm gemessen. Daher zieht die Konzentration von Cystein- und Tryptophanresten, die das Folin-Ciocalteu-Reagenz reduzieren, die Gesamtkonzentration des Proteins in der Lösung ab.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Bradford und Lowry Protein Assay?

• Bradford- und Lowry -Protein -Assays bestimmen die Proteinkonzentration in einer Lösung.
• Beide Methoden sind colourimetrische Methoden.
• Auch die Empfindlichkeit beider Methoden ist hoch.

Was ist der Unterschied zwischen Bradford und Lowry Protein Assay?

Bradford und Lowry Protein Assay sind zwei Arten von Assays, die die Proteinkonzentration in einer Lösung bestimmen. Der Bradford-Protein-Assay basiert auf der Absorptionsverschiebung des Farbstoff Coomassie Brilliant Blue G-250, während der Lowry-Protein-Assay von der Reaktion von Kupferionen abhängt, die durch die Oxidation von Peptidbindungen mit Folin-Ciocorteu-Reagenz erzeugt werden. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Bradford und Lowry Protein Assay. Der Bradford-Protein-Assay dauert 15 Minuten, um ein Ergebnis zu erzielen, während der Lowery-Protein-Assay 40-60 Minuten dauert, um ein Ergebnis zu erzielen. Dies ist daher ein weiterer Unterschied zwischen Bradford und Lowry Protein Assay. Darüber hinaus ist der Bradford -Protein -Assay von der Aminosäurezusammensetzung abhängig, während der Lowry -Protein -Assay teilweise von der Aminosäurezusammensetzung abhängt. Daher ist dies auch ein Unterschied zwischen Bradford und Lowry Protein Assay.

Nachfolgend inforaphic liefert mehr Details zum Unterschied zwischen Bradford und Lowry Protein Assay.

Zusammenfassung -Bradford gegen Lowry Protein Assay

Ein Assay ist eine analytische Technik, mit der die Hauptfunktionskomponente einer Probe charakterisiert wird. Bradford und Lowry Protein Assay sind zwei Arten von Protein -Assays, die unter kolorimetrischen Techniken funktionieren. Sowohl Bradford- als auch Lowry -Protein -Assays bestimmen die Proteinkonzentration in einer Lösung. Der wichtigste Unterschied zwischen Bradford und Lowry Protein -Assay liegt jedoch in der kolorimetrischen Technik, die sie verwenden. Bradford Protein Assay verwendet den Coomassie Brilliant Blue G-250, während Lowry Protein-Assay Kupferionen (Cu+) Ionen und Folin-Ciocorteu-Reagenz verwendet. Darüber hinaus liefert die Bradford -Methode schnelle Ergebnisse als Lowry Protein -Assay. Beide Methoden sind jedoch hochempfindliche Methoden und unterliegen Störungen aus verschiedenen Substanzen.

Referenz:

1. „Kanadisches Journal of Botanik.”Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, hier verfügbar.
2. „Chemie von Protein -Assays.”Thermo Fisher Scientific - USA, hier erhältlich.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Bradford Protein Assay" von Helito - eigener Arbeit (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia