Die Polymerasekettenreaktion (PCR) ist eine DNA -Amplifikationsmethode, die in molekularen biologischen Anwendungen verwendet wird. Es ist eine häufig verwendete Technik, die Millionen bis Milliarden Kopien einer besonders interessierten DNA -Sequenz macht. Es ist ein in vitro Methode in Laboratorien. Die PCR -Technik hängt vollständig von der kommerziell produzierten DNA -Polymerase bezeichnet. Und es erfordert auch mehrere andere Komponenten und die richtige Temperaturwartung. Eine wichtige Komponente sind Primer. Primer sind die kurzen DNA -Sequenzen, die speziell für die Ziel -DNA -Sequenz entwickelt wurden. Sie sind normalerweise etwa 20 Nukleotide lang. Taq -Polymerase katalysiert das Hinzufügen von Nukleotiden in eine bereits bestehende Nukleotidsequenz. Daher werden Primer als Ausgangspunkte der Synthese neuer Stränge bedient. Die Taq -Polymerase funktioniert nur in 5 bis 3 'Richtung. Da die DNA doppelt gestrandet ist, werden in der PCR zwei Arten von Primern benötigt. Sie sind als Forward Primer und Reverse Primer bekannt. Vorwärts- und Reverse Primer werden basierend auf der Richtung der Dehnung des Primers in DNA bezeichnet, wenn die DNA -Synthese auftritt. Forward Primer Tempern mit dem Antisense -DNA -Strang und initiiert die Synthese des + -Strangs des Gens in 5 'bis 3' Richtung. Reverse Primer temdigt den Sinnesstrang und initiiert die Synthese des komplementären Strangs des codierenden Strangs; Welches ist der Strang des Gens in 5'to 3 'Richtung. Dies ist das Schlüsselunterschied zwischen Vorwärts- und Rückwärtsprimern.
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist eine Vorwärtsgrundierung
3. Was ist ein Reverse Primer
4. Ähnlichkeiten zwischen Vorwärts- und Reverse Primer
5. Seite für Seitenvergleich - Vorwärts gegen Reverse Primer in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
Vorwärtsorientierung ist die Synthese des kodierenden Strangs oder des Sinnesstrangs eines Gens. Taq -Polymerase katalysiert die Synthese eines neuen Strangs in 5 bis 3 'Richtung. Die Synthese des kodierenden Strangs tritt auf.
Abbildung 01: Vorwärts- und Rückwärtsprimer
Der Primer, der mit dem Antisense -Strang oder dem nichtkodierenden Strang oder dem Template -Strang tankt. Vorwärtsprimer hat eine kurze Nukleotidsequenz, die zum 3 'flankierenden Ende des Antisense -Strangs ergänzt. Es hybridisiert mit dem Antisense -Strang und erleichtert die Taq -Polymerase, um Nukleotide hinzuzufügen, die zum Vorlagenstrang komplementär sind.
Reverse Primer ist die kurze DNA. Reverse Primer dient als Ausgangspunkt für die Synthese eines komplementären Strangs der Codierungssequenz oder der Nichtkodierungssequenz. Reverse Primer ist komplementär zum 3' -Ende des Codierungsstrangs entwickelt. Daher temdigt es mit dem Flanking 3' -Ende des kodierenden Strangs und ermöglicht die Taq -Polymerase, den Antisense -Strang oder den Vorlagenstrang zu synthetisieren. Da seine Ausrichtung umgekehrt ist, wird dieser Primer als Reverse Primer bezeichnet.
Beide umgekehrte und vorwärts -Primer sind wichtig für die Herstellung von Millionen bis Milliarden Kopien bestimmter Regionen DNA, die gezielt oder interessiert sind.
Vorwärtsprimer gegen Reverse Primer | |
Forward -Primer ist die kurze DNA -Sequenz, die mit dem 3' -Ende des Nichtkodierens oder dem Template -Strang des Gens hybridisiert und als Ausgangspunkt für die Synthese der Codierungssequenz dient. | Reverse Primer ist die kurze DNA -Sequenz, die mit dem 3' -Ende der Codierung oder dem Nontemplate -Strang hybridisiert und als Ausgangspunkt für die Synthese der Nichtkodiersequenz dient. |
Glühstrand | |
Vorwärts -Primer -Glühen mit Vorlagenstrang. | Reverse Primer Tempern mit dem Nontemplate -Strang. |
Resultierende neue Sequenz | |
Die Vorwärtsprimer erleichtert die Synthese der Codierungssequenz. | Reverse Primer erleichtert die Synthese der nichtkodierenden Sequenz. |
Es gibt zwei Arten von Primern, die an der PCR -Technik beteiligt sind. Sie sind vorwärts und umgekehrte Primer. Basierend auf der Dehnung des Primers in der neuen DNA -Strangsynthese werden diese Primer markiert oder benannt. Taq -Polymerase synthetisiert die neue DNA in 5 bis 3 'Orientierung. Daher werden Primer als komplementär zu 3 'Enden der Doppelstränge ausgelegt. Vorwärtsprimer, der sich in 5 bis 3 'Richtungen verlängert. Es dient als Ausgangspunkt für die Synthese -Codierungssequenz. Umgekehrter Primer, der in 5 bis 3 'Richtungen verlängert. Es dient als Ausgangspunkt für die Synthese der Nichtcodierungssequenz. Dies ist der Unterschied zwischen Vorwärts- und Reverse Primer.
1.„Primer (Molekularbiologie).”Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. Februar. 2018. Hier verfügbar
2.„Polymerasekettenreaktion (PCR)." Khan Akademie. Hier verfügbar
1.'Primer revcompcett geschmolzen2'by Richard Wheeler (Zephyris) - eigene Arbeit, (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia