Unterschied zwischen Papierdünnschicht und Säulenchromatographie

Schlüsselunterschied - Papier gegen dünne Schicht vs Spalte Chromatographie
 

Papierchromatographie, dünne Schichtchromatographie und Säulenchromatographie sind drei Arten von chromatographischen Techniken. Der Schlüsselunterschied Zwischen Papierchromatographie, Dünnschichtchromatographie und Säulenchromatographie basieren auf der Art der stationären Phase, die in der Chromatographie -Technik verwendet wird. Die Papierchromatographie verwendet ein Cellulosepapier als stationäre Phase, dünne Schichtchromatographie verwendet Aluminiumoxid- oder Kieselgel, während die Säulenchromatographie eine Säule verwendet, die mit einem geeigneten Matrixmaterial als stationäre Phase gepackt ist.

Bei der Trennung und Identifizierung von Biomolekülen wie Proteinen und Kohlenhydraten ist die Chromatographie eine wichtige biophysikalische Technik. Die Chromatographie trennt Verbindungen basierend auf ihrer Löslichkeit, Größe und Ladung. Basierend auf dem Trennmechanismus verwendet die Chromatographie Mechanismen wie Ionenaustausch, Absorption, Partition und Größenausschluss, und es gibt drei chromatographische Techniken. nämlich Papier, dünne Schicht und Säulenchromatographie. Die Papierchromatographie basiert auf der Festkörper-Adsorption und Löslichkeit der Verbindung und verwendet ein Cellulosepapier als stationäre Phase. Die dünne Schichtchromatographie basiert auf der Feststoff-Flüssig-Adsorption von Molekülen. Es hat eine stationäre Phase, die normalerweise aus Aluminiumoxid- oder Kieselgel und der mobilen Phase, die das Lösungsmittel ist. Die Säulenchromatographie verwendet eine Spalte, die mit einer Matrix gepackt ist, mit der Moleküle hauptsächlich auf der Größe, Affinität oder ihrer Ladung trennen wird.

INHALT

1. Überblick über die Chromatographie und den Schlüsselunterschied
2. Was ist Papierchromatographie
3. Was ist dünne Schichtschromatographie
4. Was ist die Säulenchromatographie
5. Ähnlichkeiten zwischen Papier, dünner Schicht und Säulenchromatographie
6. Seite für Seitenvergleich - Papier gegen dünne Schicht gegen Säulenchromatographie in tabellarischer Form
7. Zusammenfassung

Was ist Papierchromatographie?

Die Papierchromatographie ist die einfachste Art der verwendeten Chromatographie und wird nicht für umfangreiche Forschung verwendet. Es wird hauptsächlich in Studentenlabors verwendet, um Biomoleküle wie Aminosäuren und Kohlenhydrate zu identifizieren, die in Gemischen vorhanden sind. Die Papierchromatographie verwendet eine stationäre Phase, die mit Cellulosepapier oder Whatman-Filterpapier und einer mobilen Phase hergestellt wird, die normalerweise mit organischen Lösungsmitteln wie N-Butanol usw. hergestellt wird, usw. Die stationäre Phase ist mit Wasser gesättigt und macht die stationäre Phase Flüssigkeit. Wenn die Verbindungen in Gegenwart der mobilen Phase in Gegenwart der Löslichkeit der Verbindungen entdeckt und in Gegenwart der mobilen Phase laufen gelassen werden, sind sie getrennt. Somit kann bei der Entwicklung des Chromatogramms eine Färbung durchgeführt werden, um den Lauf der Länge jeder Verbindung zu bestimmen. Der Retentionsfaktor kann dadurch berechnet werden.

Abbildung 01: Papierchromatographie

Die Papierchromatographie kann weiter als aufsteigende Papierchromatographie und absteigende Papierchromatographie eingestuft werden.

Was ist dünne Schichtschromatographie?

Dünne Schichtchromatographie oder TLC ist eine häufig verwendete Technik, um verschiedene Aminosäuren zu identifizieren, die in einer Mischung vorhanden sind, oder zur Identifizierung von Proteinen. Die Trennungstechnik basiert auf der Festkörperadsorption. Während der dünnen Schichtchromatographie wird eine Platte aus Aluminiumoxid- oder Kieselgel -Gel als stationäre Phase verwendet. Das Lösungsmittelgemisch variiert nach der Anforderung und kann unterschiedliche Kombinationen von organischen Verbindungen wie N-Butanol, Essigsäure und Wasser verwenden, um das Lösungsmittel vorzubereiten. Die zu getrennten Verbindungen werden auf der Platte gesehen und in die Lösungsmittelmischung eingetaucht. Sobald das Lösungsmittel basierend auf der von der Platte angegebenen Kapillarwirkung auf den Weg ist, bewegt sich die auf der Platte entdeckten Verbindungen auch je nach Löslichkeit im Lösungsmittel.

Abbildung 02: Dünnschicht -Chromatographie

Die Erkennung der Flecken nach dem Chromatogramm wird durch verschiedene Färbungsverfahren durchgeführt. Einige verwenden eine Ninhydrinfärbung. Moderne Chromatogramme mit modernen Dünnschicht verwenden Fluoreszenztechniken, um das Chromatogramm nach dem Lauf anzuzeigen. Abhängig von den Entfernungen, die sie zurückgelegt hat, kann die Retentionszeit jeder Verbindung berechnet werden. Dies kann verwendet werden, um die Art der Verbindung zu identifizieren, die auf der verwendeten Mischung getrennt ist. TLC wird hauptsächlich verwendet, um Aminosäuren in einem Proteingemisch zu identifizieren und verschiedene Arten von Monosacchariden zu trennen, die in einer Mischung vorhanden sind.

Was ist die Säulenchromatographie?

Die Säulenchromatographie ist ein breiter Begriff, mit dem viele Arten von Chromatographie -Techniken beschrieben werden, die die spaltenbasierte Trennmethode verwenden. In der Säulenchromatographie wird eine physikalische Säule mit einem Packmaterial verwendet, um die Verbindungen zu trennen. Die Trennung kann auf verschiedenen physikalischen Eigenschaften basieren, die von den Verbindungen gezeigt werden. Diese Eigenschaften können die Ladung, Größe, 3D -Konformation und Bindungskapazität usw. sein. Somit fungiert die mit dem Matrixmaterial gepackte Säule als stationäre Phase und der Waschpuffer, der auf die Spalte angewendet wird, fungiert als mobile Phase.

Wenn die Moleküle basierend auf der Größe getrennt sind, ist das Verpackungsmaterial so gepackt, dass es Poren für die Verbindungen verlässt. Somit sind die größeren Moleküle, die nicht durch die Poren fließen können.

Abbildung 03: Säulenchromatographie

Wenn die Moleküle basierend auf ihrer Ladung getrennt sind, enthält die stationäre Phase entweder einen Anion oder einen Kationen -Austauscher, zu dem die Verbindungen aufgrund ihrer Ladung angezogen werden. So werden während des Waschschritts die nicht gebundenen Verbindungen eluiert sein. Beim Hinzufügen des Elutionspuffers werden die gebundenen geladenen Verbindungen eluiert. Die Erkennung dieser Eluenten basiert hauptsächlich auf spektrophotometrischen Techniken.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Papierdünnschicht und Säulenchromatographie?

• Alle Papierdünnschicht- und Säulenchromatographie Drei Techniken werden zur Trennung von Biomolekülen wie Aminosäuren, Proteinen und Kohlenhydraten verwendet.
• Papierdünne Schicht- und Säulenchromatographie -Techniken haben eine mobile Phase und eine stationäre Phase.
• Papierdünne Schicht- und Säulenchromatographie -Techniken verwenden biophysikalische Mechanismen zur Trennung.

Was ist der Unterschied zwischen Papierdünnschicht und Säulenchromatographie?

Zusammenfassung - Papier dünne Schicht vs Spalte Chromatographie

Papierchromatographie, TLC und Säulenchromatographie sind Trennungstechniken, die zur Trennung von Biomolekülen wie Proteinen, Aminosäuren und Kohlenhydraten (hauptsächlich Monosaccharide) verwendet werden. Die Papierchromatographie verwendet ein Cellulosepapier als stationäre Phase, und der Mechanismus der Trennung basiert auf der Feststoff-Flüssigkeits-Adsorption. TLC verwendet auch Festkörperadsorptionsmechanismen. Die Moleküle sind in der stationären Phase abhängig von ihrer Löslichkeit in der mobilen Phase getrennt. Die Säulenchromatographie verwendet physikalische Eigenschaften wie Größe, Form, Ladung und das Molekulargewicht der Verbindung, um sich zu trennen. Die mit dem Matrixmaterial gepackte Säule fungiert als stationäre Phase, während der Waschpuffer als Lösungsmittelphase fungiert. Dies ist der Unterschied zwischen einer dünnen Papierschicht und einer Säulenchromatographie.

Referenz:

1.Clark, Jim. „Dünne Schichtchromatographie.”Dünnschichtschromatographie, 2007. Hier verfügbar 
2.Coskun, Ozlem. „Trennungstechniken: Chromatographie.”Northern Clinics of Istanbul, Kare Publishing, 2016. Hier verfügbar 

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1.'Chromatographie-Tank' (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia  
2.'Tlc sequence'by quantockgoblin (öffentlich -domäne) über Commons Wikimedia
3.'Säulenchromatographie' (Public Domain) über Commons Wikimedia