Unterschied zwischen PHusion und TAQ -Polymerase

Schlüsselunterschied - Phusion vs Taq Polymerase
 

DNA -Polymerasen sind weit verbreitete Enzyme in molekularen Biologie -Techniken und sind natürlich auch in allen Organismen vorhanden, die sich einer DNA -Replikation unterziehen. Sie sind die wichtigsten polymerisierenden Enzyme, die während der Replikation beinhalten. Die DNA -Polymerase kann dem freien 3' -Ende des DNA -Strangs Nukleotide hinzufügen, wodurch die Ausdehnung eines neuen Strangs verursacht wird. Derzeit ist es aufgrund der Entwicklungen der molekularen Biologie in der Diagnose von Krankheiten und industriellen Anwendungen wichtig, Polymerasen mit verschiedenen vorteilhaften Eigenschaften herzustellen. Dies erhöht die Genauigkeit der Methode und macht sie zu einer schnellen Technik. Phusions- und Taq -Polymerase sind zwei kommerziell produzierte thermostabile Polymerase -Enzyme, die in speziellen molekularen Anwendungen verwendet werden. PHusion ist eine DNA -Polymerase, die aus isoliert ist Pyrococcus furiosus und wird hauptsächlich bei der Klonierung von Experimenten verwendet, um die Treue zu erhöhen. Die Taq -DNA -Polymerase ist die Standard -DNA -Polymerase, die in der Polymerasekettenreaktion (PCR) verwendet wird und aus dem thermostabilen Bakterium isoliert ist; Thermous aquaticus. Der Schlüsselunterschied Zwischen den beiden Enzymen befindet sich der Quellmikroorganismus. PHusion ist vom Extremophilen isoliert, Pyrococcus furiosus Während die Taq -Polymerase aus dem Thermophil isoliert ist, Thermous aquaticus.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Phusion?
3. Was ist Taq -Polymerase
4. Ähnlichkeiten zwischen PHusions- und TAQ -Polymerase
5. Seite für Seitenvergleich - Phusion vs Taq -Polymerase in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Phusion??

PHusions -DNA -Polymerase ist eine neuartige Polymerase, die durch Isolieren des Enzyms hergestellt wird Pyrococcus furiosus, Das ist eine extremophile Archaea. Diese Mikroben befinden sich unter extrem hohen Temperaturbedingungen, wodurch die Polymerase zu einer hochwärmstabilen Polymerase wird. PHusionspolymerase wird verwendet, um extreme Treue gegenüber der herkömmlichen thermostbaren Polymerase zu erhalten. Taq -Polymerase. PHusionspolymerase ist in der Lage, lange Vorlagen bis zu 7 zu verstärken.5 KB genomischer DNA. Die optimale Polymerisationskapazität der Phusionspolymerase liegt bei 72⁰ C. PHusion wird auch zur Klonierung von Produkten zur Sequenzierung, Expressionsanalyse und Mutationsanalyse verwendet.

PHusions -DNA -Polymerase hat die Exonuklease -Aktivität von 3 ' - 5'. Dies ermöglicht das Korrekturlesen des neu synthetisierten Strangs nach der Synthese. Daher können die Nucleotid -Fehlanpassungen leicht repariert werden. Somit hat es eine geringere Fehlerrate. Gesamtvorteile der Phusionspolymerase sind;

• Extreme Treue
• Hohe Geschwindigkeit und verkürzte Verlängerungszeit
• Robuste Reaktionen und erfordert minimale Optimierung
• Hohe Ausbeute

Abbildung 01: PHusion

Der Hauptnachteil der Phusionspolymerase besteht darin, dass sie in Gegenwart von Desoxyuridintriphosphat (DUTP) inhibiert wird. Wenn DUTPs im Reaktionsgemisch akkumuliert werden, kann es die Wirkungen der PHusionspolymerase hemmen. Dies wird verhindert, indem das Reaktionsgemisch mit DUTPase vor Zugabe des Enzyms behandelt wird. Gegenwärtig wird eine dULP -resistente Variante der PHusionspolymerase, die als Pfu Turbo bekannt ist.

Was ist Taq -Polymerase?

Taq -DNA -Polymerase Die Erfindung hat das Gebiet der molekularen Biologie revolutioniert. Es löste ein großes Problem bei der DNA -Verstärkung. Taq -DNA -Polymerase ist ein wärmestabiles Polymerase -Enzym extrahiert und aus dem thermophilen Bakterium isoliert, Thermous aquaticus. Die Entdeckung dieser Enzyme führt zur Entwicklung der PCR. Dieses Enzym hat die Verwendung der Polymerasekettenreaktion bei der DNA -Amplifikation anstelle von herkömmlichen mühsamen Klonierungstechniken ermöglicht. Die PCR wird jetzt in molekularen Diagnostik-, landwirtschaftlichen und industriellen Bereichen mit vielen neuen Variationen der Technik verwendet.

Abbildung 02: Taq -Polymerase

Taq -DNA -Polymerasefunktionen im optimalen Temperaturbereich zwischen 72⁰C - 80⁰C. Die TAQ-DNA-Polymerase benötigt einen Co-Faktor; Magnesium für seine Funktion. Die TAQ -Polymerase hat nicht die 3 ' - 5' Korrekturlesen Fähigkeit, daher ist die Fehlerrate der Taq -DNA -Polymerase im Vergleich zu neueren Arten von DNA -Polymerasen wie PHusionspolymerase usw. hoch. Die Popularität der Taq -DNA -Polymerase bleibt jedoch in der Welt der Wissenschaft aufgrund der Bequemlichkeit und der Flexibilität des Enzyms gleich nach wie vor.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Phusion und Taq -Polymerase?

• Sowohl PHusions- als auch Taq -Polymerase -Enzyme sind polymerisierende Enzyme.
• Sowohl PHusions- als auch TAQ -Polymerasen erfordern eine Primersequenz, um die Polymerisation zu initiieren.
• Sowohl PHusions- als auch TAQ -Polymerasen sind hitzebestelungsstabil.
• Sowohl PHusions- als auch TAQ -Polymerasen werden in PCR -Mechanismen verwendet, um die DNA zu verstärken.
• Bei der Zugabe der Polymerase zum Reaktionsgemisch werden sowohl PHusions- als auch TAQ -Polymerasen zuletzt zugegeben, um die Effizienz des Enzyms zu gewährleisten.
• Sowohl PHusions- als auch TAQ -Polymerasen werden kommerziell für experimentelle Zwecke der molekularen Biologie synthetisiert.
• Sowohl PHusion- als auch TAQ -Polymerasen erfordern einen Cofaktor, um seine Funktion zu vervollständigen.

Was ist der Unterschied zwischen Phusions- und Taq -Polymerase?

Zusammenfassung - PHusion vs Taq Polymerase

PHusions- und Taq -DNA -Polymerase sind zwei wärmestabile Polymerasen, die in PCR -Techniken verwendet werden. PHusion ist eine aus dem Extremophilen isolierte Polymerase, Pyrococcus furiosus Während Taq aus den thermostabilen Bakterien isoliert ist Thermous aquaticus. Die Entdeckung von Taq -DNA -Polymerase führt zur PCR -Erfindung. PHusion hat viele Vorteile gegenüber TAQ, die Phosion zu einer besseren Option bei der Herstellung von High -Fidelity -DNA gemacht haben. Taq -Polymerase wird jedoch weiterhin als Standardpolymerase -Enzym in PCR verwendet. Dies ist der Unterschied zwischen Phusions- und Taq -Polymerase.

Referenz:

1.Biolabs, Neuengland. „Taq -DNA -Polymerasen.New England Biolabs: Reagenzien für die Biowissenschaftsbranche. Hier verfügbar  
2.„PHusions -DNA -Polymerase.New England Biolabs. Hier verfügbar 

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1.'GAM illustriert von Nivin Nasri'by Nivinn - eigene Arbeit, (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia  
2.'Taq'by Adenosine - eigene Arbeit, (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia