Unterschied zwischen radioaktiven und nicht radioaktiven Sonden
Der Schlüsselunterschied Zwischen radioaktiven und nicht radioaktiven Sonden ist das Radioaktive Sonden sind einsträngige DNA- oder RNA.
Die Hybridisierung von Nukleinsäure ist eine wichtige Technik in der molekularen Biologie, insbesondere in der mikrobiellen Diagnose. Es hilft, eine bestimmte Nukleinsäuresequenz zu identifizieren oder nachzuweisen. In dieser Technik werden Nukleinsäuren an einer festen Oberfläche fixiert und mit einer Sonde hybridisiert. Eine Sonde ist ein Fragment aus DNA oder RNA, das zu einer Interessensequenz ergänzt wird. Wenn die Zielsequenz in der Probe vorhanden ist, hybridisiert die Sonde damit und macht sie nachweisbar. Es gibt zwei Arten von Sonden als radioaktive und nichtradioaktive Sonden. Daher können wir die Sonden mit einem radioaktiven Tag oder einem fluoreszierenden Tag markieren.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was sind radioaktive Sonden
3. Was sind nichtradioaktive Sonden
4. Ähnlichkeiten zwischen radioaktiven und nicht radioaktiven Sonden
5. Seite für Seitenvergleich - radioaktive vs nicht radioaktive Sonden in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
Was sind radioaktive Sonden?
Radioaktive Sonden sind die einzelsträngigen DNA- oder RNA-Fragmente mit einem radioaktiven Tag. Radioisotope werden zur Vorbereitung radioaktiver Sonden verwendet. Radioisotope 32P, 33P und 35S werden üblicherweise bei der Markierung von Sonden verwendet. Darüber hinaus Radioisotope 3Hand 1251 werden auch in geringerem Maße bei der Markierung von Sonden verwendet. Sie werden jedoch für bestimmte Anwendungen verwendet. Unter verschiedenen Radioisotopen, 32P ist das am häufigsten verwendete Isotop bei der Markierung radioaktiver Sonden.
Radioaktive Sonden bieten ein höheres Maß an Zuverlässigkeit und Spezifität. Daher bieten sie eine maximale Empfindlichkeit und ermöglichen eine genaue Quantifizierung von Zielsequenzen. Mit radioaktiven Sonden sind jedoch mehrere Nachteile verbunden. Sie haben kurze Halbwertszeiten. Darüber hinaus sind sie gefährlich und Produktion, Verwendung und Entsorgung sind beim Handling problematisch. Darüber hinaus ist die radioaktive Sondenvorbereitung ein kostspieliger Prozess. Daher werden aufgrund der Sicherheitsprobleme und Kosten heutzutage nicht als nicht radioaktive Sonden verwendet.
Was sind nichtradioaktive Sonden?
Nichtradioaktive Sonden sind die zweite Art von Sonden, die chemisch markiert sind. Digoxigenin ist eine nicht radioaktive Sonde, eine auf Antikörper basierende Marker. Digoxigenin -Sonden sind spezifisch und empfindlich. Biotin ist ein weiteres Etikett, das in der nichtradioaktiven Sondenpräparation verwendet wird. Biotin/Streptavidin- und Digoxigenin/Antikörper-Detektionssysteme sind die am häufigsten verwendeten nichtradioaktiven Sonden bei der Hybridisierung. Darüber hinaus ist das Meerrettich -Peroxidase -System ein weiteres nicht -radioaktives Sondensystem. Sobald diese nicht radioaktiven Sonden mit den Zielsequenzen hybridisiert sind, können sie über Autoradiographie oder andere Bildgebungstechniken nachgewiesen werden.
Abbildung 01: Hybridisierung mit nichtradioaktiven Sonden
Nichtradioaktive Sonden werden häufiger bei der Hybridisierung von Nukleinsäure als radioaktive Sonden verwendet. Dies liegt daran, dass nichtradioaktive Sonden nicht mit gefährlichen Materialien verbunden sind. Darüber hinaus erfordern nichtradioaktive Nachweismethoden kürzere Expositionszeiten, um das Hybridisierungssignal zu erkennen. Die Schritte, die an der DNA-Hybridisierung mit nichtradioaktiven Sonden beteiligt sind, sind jedoch normalerweise mühsam und zeitaufwändig. Darüber hinaus sind im Handel erhältliche Lösungen teuer.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen radioaktiven und nichtradioaktiven Sonden?
- Radioaktive und nicht radioaktive Sonden sind zwei Arten von Sonden, die bei der Hybridisierung von Nukleinsäure verwendet werden.
- Sie erleichtern die Erkennung von Zielsequenzen in der Probe.
- Beide Arten von Sonden sind gleichermaßen empfindlich und spezifisch.
Was ist der Unterschied zwischen radioaktiven und nichtradioaktiven Sonden?
Radioaktive Sonden sind die mit radioaktiven Isotopen markierten einzelsträngigen DNA- oder RNA-Sequenzen. Dies ist also der wichtigste Unterschied zwischen radioaktiven und nichtradioaktiven Sonden. Auch radioaktive Isotope sind gefährlich. Daher sind radioaktive Sonden erheblich gefährlich, während nichtradioaktive Sonden nicht gefährlich sind.
Ein weiterer Unterschied zwischen radioaktiven und nichtradioaktiven Sonden sind ihre Nachteile. Kurze Halbwertszeiten und die mit ihrer Produktion, Verwendung und Entsorgung verbundenen Gefahren sind die Nachteile der Verwendung von radioaktiven Sonden. Andererseits sind die Schritte, die an der DNA-Hybridisierung mit nichtradioaktiven Sonden beteiligt sind, normalerweise mühsam und zeitaufwändig.
Die folgende Infografik zeigt mehr Vergleiche im Zusammenhang mit dem Unterschied zwischen radioaktiven und nichtradioaktiven Sonden.
Zusammenfassung -radioaktive gegen nicht radioaktive Sonden
Eine Sonde ist ein Fragment von DNA oder RNA, das eine Nukleotidsequenz enthält, die zu der Interessensequenz ergänzt. Um die Zielsequenz zu erkennen, können die Sonden radioaktiv, fluoreszent oder chemisch markiert werden. Sonden binden mit komplementären Sequenzen in der Probe. Radioaktive Sonden sind mit radioaktiven Isotopen markiert, während nichtradioaktive Sonden mit Biotin, Digoxigenin oder Meerrettichperoxidase markiert sind. Dies ist daher der wichtigste Unterschied zwischen radioaktiven und nichtradioaktiven Sonden.
Referenz:
1. "Hybridisierungssonde". En.Wikipedia.Org, 2020, hier erhältlich.
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "Ergebnisse der In -situ -Hybridisierung von Chromosom X und Y BAC -Sonden" von Joanne H. Hsu, Hui Zeng, Kalistyn H. Lemke, Aris a. Polyzos, Jung. Weier, Mei Wang, Anna R. Lawin-o'brien, Heinz-ulrich g. Weier und Benjamin O'Brien - Joanne H. Hsu et al. "Chromosomenspezifische DNA-Wiederholungen: schnelle Identifizierung in Silico und Validierung unter Verwendung von Fluoreszenz-In-situ-Hybridisierung" Int ". J. Mol. Sci. 2013, 14 (1), 57-71; doi: 10.3390/IJMS14010057 (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
