Unterschied zwischen RP HPLC und HIC
Der Schlüsselunterschied Zwischen RP HPLC und HIC ist das RP HPLC verwendet eine polarere mobile Phase und eine weniger polare stationäre Phase. Während HIC eine hydrophobe stationäre Phase verwendet, die es den hydrophoben Molekülen ermöglicht, sich daran zu befestigen.
Die Chromatographie ist eine analytische Technik, mit der eine Mischung in ihre Komponenten unterteilt wird. Zunächst müssen wir die Probe auflösen, um in eine Lösung unterteilt zu werden. Diese Lösungs-Substanz-Mischung wird als mobile Phase bezeichnet. Dann wird die mobile Phase durch ein anderes Material geleitet, das als stationäre Phase bezeichnet wird. Die stationäre Phase bestimmt die Trennung der Komponenten. Die Trennung erfolgt aufgrund der Aufteilung des Materials zwischen der mobilen Phase und der stationären Phase.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist RP HPLC
3. Was ist hic
4. Seite an Seite Vergleich -RP HPLC vs. HIC in tabellarischer Form
5. Zusammenfassung
Was ist RP HPLC?
Der Begriff RP HPLC steht für Reverse Phase High-Performance-Flüssigchromatographie. Es beinhaltet die Trennung von Komponenten in einer Mischung gemäß Hydrophobizität. Die hydrophoben Komponenten in der mobilen Phasenverbindung mit den immobilisierten hydrophoben Liganden in der stationären Phase, während hydrophile Komponenten durch die stationäre Phase fließen, ohne an die Oberfläche der stationären Phase gebunden zu werden.
Abbildung 01: HPLC -Apparat
Darüber hinaus ist diese Methode im Vergleich zu anderen chromatographischen Techniken mehr Reproduzierbarkeit und zeigt auch breite Anwendbarkeit. Daher verwenden wir diese Methode in Laboratorien für über 75% aller HPLC -Methoden. Meistens verwenden wir eine wässrige Wassermischung mit einem mischbaren polaren organischen Lösungsmittel als mobile Phase. Daher wird es die Befestigung der hydrophoben Komponenten in der Lösung an der Oberfläche der stationären Phase gewährleisten.
Was ist hic?
Der Begriff HIC steht für Hydrophobe Wechselwirkungschromatographie. Es handelt sich um eine Art HPLC der Reverse -Phase, und diese Methode wird hauptsächlich zur Trennung großer Biomoleküle wie Proteine verwendet. Bei dieser Methode müssen wir ein wässriges Medium verwenden, um die Probe der Biomolekül zu erstellen. Es liegt daran, dass organische Lösungsmittel die Denaturierung der Proteine verursachen können. Darüber hinaus verwendet diese Technik die Wechselwirkung zwischen großen Molekülen mit einer leicht hydrophoben Oberfläche der stationären Phase. Darüber hinaus müssen wir eine hohe Salzkonzentration in der Probe verwenden, da es das Protein ermutigt, auf der Verpackung beibehalten zu werden. Dieser Prozess wird als Salzen bezeichnet. Indem wir die Salzkonzentration allmählich verringern, können wir die Biomoleküle nach ihrer Hydrophobizität getrennt zum Ausdruck bringen.
Normalerweise verwendet diese Methode die Bedingungen gegenüber der der Ionenaustauschchromatographie. In dieser Technik müssen wir zunächst eine Pufferlösung durch die Säule übertragen, um die Solvatation des gelösten Stoffes in der Probe zu verringern. Es macht die hydrophoben Regionen des Proteins ausgesetzt. Wenn das Molekül jedoch hydrophoben ist, ist weniger Salz erforderlich, um die Bindung zu fördern. Hier werden die weniger hydrophoben gelösten Stoffe zuerst eluiert, und je nach der Veränderung der Salzkonzentration werden mehr hydrophobe Stoffe gelassen.
Was ist der Unterschied zwischen RP HPLC und HIC?
Die Chromatographie ist eine analytische Technik zur Trennung von Komponenten in einer Mischung. RP HPLC und HIC sind zwei spezialisierte chromatographische Techniken. Der wichtigste Unterschied zwischen RP HPLC und HIC besteht darin, dass RP HPLC eine polarere mobile Phase und eine weniger polare stationäre Phase verwendet, während HIC eine hydrophobe stationäre Phase verwendet, die es den hydrophoben Molekülen ermöglicht.
Die folgende Infografik fasst den Unterschied zwischen RP HPLC und HIC zusammen.
Zusammenfassung -RP HPLC vs. HIC
Die Chromatographie ist eine analytische Technik zur Trennung von Komponenten in einer Mischung. RP HPLC und HIC sind zwei spezialisierte chromatographische Techniken. Der Hauptunterschied zwischen RP HPLC und HIC besteht darin, dass RP HPLC eine polarere mobile Phase und eine weniger polare stationäre Phase verwendet, während HIC eine hydrophobe stationäre Phase verwendet, die es den hydrophoben Molekülen ermöglicht, sich an sie zu befestigen.
Referenz:
1. „HPLC -Trennmodi.”Wasser, hier erhältlich.
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "Preparative HPLC" von Gyassinemrabettalk✉this W3C-nicht genannte Vektorbild wurde mit Inkscape erstellt. - Eigene Arbeit (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
