Unterschied zwischen Stapelgel und Trennung von Gel
Schlüsselunterschied - Stapelgel gegen Trennung Gel
Die Begriffe stapeln Gel und Trenngel werden verwendet, um die SDS-PAGE-Technik zu erklären. SDS-PAGE- oder Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese ist eine Labortechnik, mit der Proteinmoleküle basierend auf ihren molekularen Gewichten getrennt werden. Die Theorie hinter der Technik ist, dass Proteine mit unterschiedlichen Molekulargewichten unterschiedliche Migrationsraten zeigen; Moleküle mit niedrigem Molekulargewicht wandern schneller, während Moleküle mit hohem Molekulargewicht langsam wandern. Das Medium zur Migration ist ein Gel. Es gibt zwei Arten von Gelen, die als Stapelgel und Trenngel bezeichnet werden. Der Schlüsselunterschied Zwischen dem Stapeln von Gel und dem Trennen von Gel ist das Der pH -Wert des Stapelgels beträgt 6.8 Während der pH des Trenngels 8 beträgt 8.8.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Stapelgel
3. Was trennt Gel
4. Beziehung zwischen Stapelgel und Trennung von Gel
5. Seite an Seitenvergleich - Stapelgel gegen das Trennen von Gel in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
Was ist Stapelgel?
Das Stapelgel ist ein niedrig konzentriertes Polyacrylamidgel, das auf der SDS-Page. Das Stapelgel wird verwendet, um die Auflösung der Elektrophorese zu verbessern. Die Auflösung nimmt aufgrund des Unterschieds zwischen den Konzentrationen von Stapelgel und dem Auflösungsgel zu, die sich auf die Proteine in der Probe auswirken. Da die Konzentration von Polyacrylamid im Stapelgel niedrig ist, ist die Porengröße höher. Dies hilft auch bei der Erhöhung der Trennung.
Das Stapelgel ist ein lose Polyacrylamidgel mit großen Poren von etwa 7% Polyacrylamid. Diese Poren wirken nicht als beträchtliche Barriere für große Proteinmoleküle. Daher wirkt sich dieses Gel leicht auf die Mobilität dieser Proteine aus. Dies macht die Trennung entsprechend der Mobilität und Größe des Proteins, indem sie sie zwischen zwei Gelen konzentriert.
Abbildung 01: SDS-Page-Acrylamidgel
Der pH -Wert des Stapelgels beträgt 6.8. Sein pH -Wert ist sauer als der des Auflösen von Gel durch 2 pH -Einheiten. Dieser pH impliziert eine niedrigere Ionenstärke, daher ein höherer elektrischer Widerstand. Dies provoziert die Mobilität von Proteinen als andere im Gel vorhandene geladene Partikel.
Was trennt Gel?
Das Trennen von Gel oder das Auflösungsgel einer SDS-Pagetechnik ist ein hoch konzentriertes Polyacrylamidgel, das auf der Oberseite des niedrig konzentrierten Stapelgels platziert ist. Das Trenngel enthält eine hohe Menge an Polyacrylamid (10%). Der pH -Wert dieses Gels wird als pH = 8 gehalten.8, was ein höherer pH -Wert als das des Stapelgels ist.
Abbildung 02: Ein Gelelektrophorese -Gerät
Wenn die Proteinmoleküle das Trenngel erreichen, wird die Migration dieser Moleküle verlangsamt. Diese Verlangsamung ermöglicht es, dass die anderen Proteine langsam aufholen, was zu einem schmalen, konzentrierten Band zwischen den beiden Gelen führt.
Wie ist die Beziehung zwischen Stapelgel und Trennung von Gel?
- Sowohl Stapelgel- als auch Trenngeltypen werden in demselben Gerät verwendet.
Was ist der Unterschied zwischen Stapelgel und Trennung von Gel?
Stapelgel gegen Trennung von Gel | |
| Das Stapelgel ist ein niedrig konzentriertes Polyacrylamidgel, das auf der SDS-Page. | Das Trennen von Gel oder das Auflösen von Gel einer SDS-PAGE-Technik ist ein hoch konzentriertes Polyacrylamidgel, das auf der Oberseite eines geringen konzentrierten Stapelgels platziert ist. |
| Platzierung | |
| Stapelgel wird auf das Auflösungsgel (Trennung) platziert. | Das Trenngel wird am Boden des Behälters platziert, der für die Gelelektrophorese verwendet wird. |
| Konzentration | |
| Die Konzentration des Stapelgels ist hoch. | Die Konzentration des Trenngels ist niedrig. |
| Polyacrylamidgehalt | |
| Stapelgel enthält etwa 7% Polyacrylamid. | Das Trennung von Gel enthält etwa 10% Polyacrylamid. |
| pH | |
| Der pH -Wert des Stapelgels beträgt 6.8. | Der pH des Trenngels beträgt 8.8. |
| Porengröße | |
| Große Porengrößen sind im Stapelgel vorhanden. | Bei der Trennung von Gel sind kleine Porengrößen vorhanden. |
| Auflösung | |
| Stapelgel verleiht eine bessere Auflösung. | Die Trennung von Gel gibt eine schlechte Auflösung. |
Zusammenfassung - Stapelgel gegen Trennung Gel
Stapelgel und Trenngel sind zwei Arten von Polyacrylamidgelen, die verwendet werden, um eine bessere Trennung von Proteinmolekülen in einer gegebenen Probe zu erhalten. Der Unterschied zwischen Stapelgel und Trennung von Gel besteht darin, dass der pH -Wert des Stapelgels 6 beträgt.8 Während der pH des Trenngels 8 beträgt 8.8.
Referenz:
1.„Polyacrylamidgelelektrophorese.Polyacrylamid -Gelelektrophorese (Theorie): Molekulare Biologie Virtual Lab II: Biotechnologie und Biomedizinische Engineering: Amrita Vishwa Vidyapeetham Virtual Lab. Hier verfügbar
2.„Wie SDS-PAGE funktioniert.”Biesize Bio, 16. Februar. 2018. Hier verfügbar
3.„SDS-PAGE-Stapelgel-Bich 608 (Polymenis-Petigrew).”Google -Websites. Hier verfügbar
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1.'SDS-Page Acrylamid Gel'by Bensaccount in englischer Wikipedia (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
2.'Gelelektrophorese -Apparat' von Jeffrey M. Vinocur - eigene Arbeit, (cc -by 2.5) über Commons Wikimedia
