Was ist der Unterschied zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese

Der Schlüsselunterschied zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese ist, dass die Agarosegelelektrophorese horizontal gegossene Agarosegele verwendet, um vergleichsweise größere DNA -Fragmente zu trennen, während Polyacrylamid -Gelelektrophorese vertikal gegossene Polyacrylamidgele verwendet.

Die Elektrophorese ist eine Art von Technik, die ein elektrisches Feld verwendet, das auf einer Gelmatrix angewendet wird, um Biomoleküle wie DNA, RNA und Proteine ​​zu trennen. Diese Trennung von Biomolekülen wie DNA, RNA und Proteinen durch Elektrophorese basiert auf Ladung und Größe. Die Proben werden in die Brunnen des Gels geladen. Später wird das elektrische Feld über das Gel aufgetragen. Das Feld bewirkt, dass sich negativ geladene Moleküle in Richtung der positiven Elektrode bewegen. Die Gelmatrix wirkt als molekular. Dies ermöglicht die Trennung von Molekülen basierend auf Ladung und Größe. Daher sind Agarose- und Polyacrylamid -Gelelektrophorese zwei Arten von Gelelektrophorese -Techniken, die hauptsächlich dazu beitragen.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Agarosegelelektrophorese
3. Was ist Polyacrylamid -Gelelektrophorese
4. Ähnlichkeiten -Agarose- und Polyacrylamid -Gelelektrophorese
5. Agarose gegen Polyacrylamid -Gelelektrophorese in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung -Agarose gegen Polyacrylamid -Gelelektrophorese

Was ist Agarosegelelektrophorese?

Agarosegelelektrophorese ist eine Technik, die Agarosegele verwendet, um Biomoleküle wie DNA und RNA zu trennen. Es ist eine Technik, mit der Nukleinsäuren hauptsächlich nach Größe trennen. Die in dieser Technik verwendete Hauptverbindung namens Agarose ist ein Polysaccharid. Es kommt von Seetangs. Agarose kann in Kochpuffer gelöst und dann in ein Tablett gegossen werden, das horizontal aufbewahrt wird. Im Tablett wird es verfestigt, wenn es sich abkühlt, um eine Platte zu bilden. Agarosegele werden mit einem Kamm an Ort und Stelle gegossen, um Brunnen herzustellen, in die Nukleinsäuren wie DNA oder RNA geladen werden, sobald das Gel sich erstarrt hat.

Abbildung 01: Agarosegelelektrophorese

Das Gel wird später in einen geeigneten Puffer eingetaucht, und ein Strom wird über das Gel angewendet. DNA hat eine einheitliche negative Ladung, die unabhängig von der Sequenzzusammensetzung des Moleküls ist. Daher wandern DNA-Moleküle von der Kathode (-) in Richtung der Anode (+). Die Migrationsrate hängt direkt von der Größe des Moleküls ab. Die größten Makromoleküle haben die schwierigste Zeit, das Gel durch das Gel zu navigieren. Andererseits rutschen die kleineren Makromoleküle schnell und ganz einfach durch das Gel.

Was ist Polyacrylamid -Gelelektrophorese?

Polyacrylamid -Gelelektrophorese (Seite) ist eine Technik, die Polyacrylamidgele verwendet, um Biomoleküle zu trennen. Es ist eine Technik, die häufig verwendet wird, um biologische Makromoleküle, normalerweise Proteine ​​und Nukleinsäuren, gemäß ihrer elektrophoretischen Mobilität zu trennen. Die Hydratation von Acrylonitril führt zur Bildung von Acrylamidmolekülen durch Nitrilhydratase. Acrylamid ist in Wasser löslich und polymerisiert Acrylamid, was zur Bildung von Polyacrylamidgel führt. Normalerweise führen erhöhte Konzentrationen von Acrylamid zu einer verminderten Porengröße im Gel. Polyacrylamidgele werden im Gegensatz zu Agarosegelen vertikal gegossen.

Abbildung 02: Polyacrylamid -Gelelektrophorese

Bei Polyacrylamid-Gelelektrophorese können die Moleküle in ihrem nativen Zustand laufen und die Struktur höherer Ordnung von Molekülen bewahren. Diese Methode wird als native Seite bezeichnet. Alternativ kann auch ein chemisches Denaturanten hinzugefügt werden, um die Struktur höherer Ordnung zu entfernen und das Molekül in ein unstrukturiertes Molekül zu verwandeln, dessen Mobilität nur von seiner Länge abhängt. Dieser Typ wird als SDS-PAGE bezeichnet.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese?

• Agarose- und Polyacrylamid -Gelelektrophorese sind zwei Arten von Gelelektrophorese -Techniken.
• Tatsächlich sind sie molekulare biologische Techniken.
• Beide Techniken werden verwendet, um biologische Makromoleküle wie DNA und Proteine ​​nachzuweisen.
• Diese Techniken werden von erfahrenen Technikern oder Forschern durchgeführt.
• In beiden Techniken basiert die Trennung von Makromolekülen auf der Ladung und der Größe.
• Beide Techniken ermöglichen die Trennung von Nukleinsäuren wie DNA und RNA.

Was ist der Unterschied zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese?

Agarosegelelektrophorese ist eine Technik, die horizontal gegossene Agarosegele verwendet, um Biomoleküle zu trennen. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese. Darüber hinaus wird die Agarosegelelektrophorese zur Trennung von DNA und RNA verwendet, während die Polyacrylamid -Gelelektrophorese zur Trennung von Nukleinsäuren wie DNA, RNA oder Proteinen verwendet wird.

Die folgende Tabelle fasst den Unterschied zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese zusammen.

Zusammenfassung -Agarose gegen Polyacrylamid -Gelelektrophorese

Agarose- und Polyacrylamid -Gelelektrophorese sind zwei Arten von Gelelektrophorese -Techniken, die in molekularen Biologie -Laboratorien verwendet werden. Agarosegelelektrophorese verwendet ein Agarosegel, um Biomoleküle zu trennen. Agarose ist für den Menschen im Allgemeinen nicht toxisch, während Polyacrylamid für den Menschen giftig ist. Darüber hinaus zeigt die Agarosegelelektrophorese eine geringe Auflösung, während Polyacrylamid -Gelelektrophorese eine mehr Auflösung zeigt. Polyacrylamidgelelektrophorese verwendet ein Polyacrylamidgel, um Biomoleküle zu trennen. Dies fasst den Unterschied zwischen Agarose und Polyacrylamid -Gelelektrophorese zusammen

 Referenz:

1. "Agarose-Gelelektrophorese.”Ein Überblick | Sciencedirect -Themen.
2. „Polyacrylamidgelelektrophorese.”Ein Überblick | Sciencedirect -Themen.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Agarosegelelektrophorese" von Plaxcolab (CC von 2.0) über Flickr
2. „Polyacrylamidgelelektrophorese von Proteinen“ von Jean-Etienne Minh-duy Poirrier aus Bruxelles, Belgien-Proteine ​​in einer 1d-Gelelektrophorese (CC BY-SA 2.0) über Commons Wikimedia