Was ist der Unterschied zwischen Hefe und Hefe zwei Hybrid

Der Schlüsselunterschied Zwischen Hefe ein Hybrid und Hefe zwei Hybrid ist diese Hefe ein Hybrid ist ein in vitro basierter Assay zur Analyse von DNA-Protein-Wechselwirkungen, während Hefe zwei Hybrid ein in vitro basierender Assay zur Analyse von Protein-Protein-Wechselwirkungen.

Die Untersuchung der Wechselwirkungen zwischen zellulären Molekülen kann dazu beitragen, Erkennungsstellen zu definieren, die an den Genexpression und Proteinwege beteiligt sind. DNA- und Proteinwechselwirkungen sind ein wesentlicher Bestandteil von zellulären Prozessen wie DNA -Modifikationen und Transkriptionsregulation usw. Andererseits spielen Protein- und Proteinwechselwirkungen eine wichtige Rolle bei zellulären Prozessen wie Replikation, Transkription, Translation und Signaltransduktion. Daher ist es von entscheidender Bedeutung, diese Wechselwirkungen von zellulären Molekülen durch verschiedene Assays zu identifizieren. Hefe ein Hybrid und Hefe zwei Hybrid sind zwei in vitro basierende Assays zur Analyse von DNA-Protein- und Protein-Protein-Wechselwirkungen.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Hefe ein Hybrid
3. Was ist Hefe zwei Hybrid
4. Ähnlichkeiten -Hefe ein Hybrid und Hefe zwei Hybrid
5. Hefe ein Hybrid gegen Hefe zwei Hybrid in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung -Hefe ein Hybrid gegen Hefe zwei Hybrid

Was ist Hefe ein Hybrid?

Hefe ein Hybrid (Y1H) ist ein in vitro basierender Assay zur Analyse intrazellulärer DNA-Protein-Wechselwirkungen. Diese Methode wurde zuerst von Wang und Reed 1993 festgelegt. Seitdem hat es eine größere Macht in der biologischen Forschung gezeigt. In diesem Assay gibt es zwei Hauptkomponenten: DNA -Köder und Proteinvorschriften.

Abbildung 01: Hefe ein Hybrid

In der Prozedur wird eine DNA -Sequenz (DNA -Köder) zuerst stromaufwärts von zwei verschiedenen Reportern (His3, Lacz) kloniert. Diese Reporterkonstrukte sind in das Genom eines Hefe -Stammes integriert. Transkriptionsfaktoren werden als Proteinvorys angenommen. Transkriptionsfaktoren werden mit der Transkriptionsaktivierungsdomäne (AD) des Hefe -Gal4 -Transkriptionsfaktors fusioniert, um Hybridproteine ​​herzustellen. Dieses gesamte Hybridprotein ist in ein Plasmid integriert, bevor es in den Hefestamm einführt. Nach der Einführung des rekombinanten Plasmids aktiviert die AD -Einheit, wenn der Transkriptionsfaktor mit dem DNA -Fragment interagiert, die Reporter -Genexpression (His3or Lacz). Die Sequenzierung der Plasmide ermöglicht die Identifizierung des Transkriptionsfaktors, der an das DNA -Fragment binden kann. Vor kurzem wurde eine Hefe -One -Hybridmethode verwendet, um die Diagnose der Krankheit zu erforschen. Daher wird dieser Assay in Zukunft in wissenschaftlicher Forschung und medizinischen Behandlungen häufiger eingesetzt werden.

Was ist Hefe zwei Hybrid?

Hefe zwei Hybrid (Y2H) ist ein in vitro basierender Assay zur Analyse intrazellulärer Protein- und Proteinwechselwirkungen. Diese Methode wurde ursprünglich von Stanley Fields und OK-Kyu Song im Jahr 1989 gefunden. Diese Technik erkennt Protein-Protein-Wechselwirkungen unter Verwendung des Gal4-Transkriptionsfaktors der Hefe.

Abbildung 02: Hefe zwei Hybrid

Bei dieser Methode werden zwei Fusionen (Hybride) zuerst unter Verwendung von interessierenden Proteinen konstruiert: ein Protein mit DNA -Bindungsdomäne (DBD) und durch Fusion des anderen Proteins mit der Aktivatordomäne (AD) des Gal4 -Transkriptionsfaktors zu verschmelzen. Das mit DBD verschmierte Protein ist als Köder bekannt, während das mit AD verschmuste Protein als Beute bekannt ist. In der Hefestamm werden nach der Wechselwirkung von Köder und Beute DBD und AD in unmittelbarer Nähe gebracht, um einen funktionellen Gal4 -Transkriptionsfaktor vor dem Reportergen zu erzeugen. Der funktionelle Transkriptionsfaktor aktiviert die Reportergenexpression. Darüber hinaus wird diese Methode derzeit verwendet, um die Wechselwirkungen von integralen Membranproteinen in Säugetierzellen zu überprüfen.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Hefe und Hefe zwei Hybrid?

• Hefe ein Hybrid und Hefe zwei Hybrid sind zwei in vitro basierende Assays zur Analyse von DNA-Protein- und Protein-Protein-Wechselwirkungen.
• Diese Assays verwenden Hefestämme.
• Beide Assays verwenden die Aktivierungsdomäne (AD) des Gal4 -Transkriptionsfaktors.
• Sie verwenden die Reporter -Genexpression (HIS3 oder LACZ), um Wechselwirkungen zu erkennen.
• Sie haben Köder und Beute.
• Beide Assays sind in der modernen biologischen Forschung sehr nützlich.

Was ist der Unterschied zwischen Hefe und Hefe zwei Hybrid?

Hefe ein Hybrid ist ein in vitro basierter Assay zur Analyse von DNA- und Proteinwechselwirkungen, während Hefe zwei Hybrid ein in vitro basierender Assay zur Analyse von Protein- und Proteinwechselwirkungen. Somit ist dies der Schlüsselunterschied zwischen Hefe und Hefe zwei Hybrid. Darüber hinaus ist Köder in Hefe ein Hybrid ein DNA -Fragment und Beute ist ein Proteinmolekül. Andererseits sind in Hefe zwei Hybrid, sowohl Köder als auch Beute, Proteinmoleküle.

Die folgende Infografik listet die Unterschiede zwischen Hefe ein Hybrid und Hefe zwei Hybrid in tabellarischer Form für Seite für Seitenvergleich auf.

Zusammenfassung -Hefe ein Hybrid gegen Hefe zwei Hybrid

Hefe ein Hybrid und Hefe Zwei Hybrid sind zwei wichtig in vitro basierte Assays. Hefe ein Hybrid ist ein in vitro basierter Assay zur Analyse von DNA- und Proteinwechselwirkungen, während Hefe zwei Hybrid ein in vitro basierender Assay zur Analyse von Protein- und Proteinwechselwirkungen. Somit ist dies der Schlüsselunterschied zwischen Hefe und Hefe zwei Hybrid.

Referenz:

1. Reece-Hoyes, John S. und Albertha J M Walhout. „Gen-zentrierte Hefe-One-Hybrid-Assays.Methoden in der molekularen Biologie (Clifton, N.J.), U.S. National Library of Medicine, 2012.
2. Shaffer, Dr. Catherine. „Anwendungen des Hefe-Zwei-Hybrid-Screenings.Nachrichten, 26. Februar. 2019.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Abbildung 17 05 01" von CNX OpenStax - (cc von 4.0) über Commons Wikimedia
2. "Two Hybrid Assay" von Anna - eigene Arbeit (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia