Der Schlüsselunterschied Zwischen 1D- und 2D -Gelelektrophorese sind die Eigenschaften zur Trennung von Proteinen auf Gelelektrophorese verwendet. 1D-Gelelektrophorese trennt nur Proteine basierend auf dem Molekulargewicht, während die 2D-Gelelektrophorese Proteine basierend auf seinem ISO-Elektrischen Punkt und Molekulargewicht trennt.
Proteintrennung durch Gelelektrophorese ist eine wichtige Technik, um Proteine zu charakterisieren. Proteine haben unterschiedliche Eigenschaften; Daher ist die Trennung komplexer im Vergleich zur DNA -Trennung durch Agarosegelelektrophorese.
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist 1D -Gelelektrophorese
3. Was ist 2D -Gelelektrophorese
4. Ähnlichkeiten zwischen 1D und 2D -Gelelektrophorese
5. Seite für Seitenvergleich - 1D vs 2d Gelelektrophorese in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
1D -Gelelektrophorese, auch als eine Dimension Gelelektrophorese bekannt, ist eine Methode zur Proteintrennung basierend auf dem Molekulargewicht. Die Proteintrennung findet hauptsächlich unter Verwendung von Polyacrylamid -Gelelektrophorese statt. Basierend auf dem Konzept der Gelelektrophorese trennen sich Moleküle von ihrer Eigenschaft von Molekulargewicht und Ladung.
Um den Proteinen eine gleichmäßige Ladung zu verleihen, erfolgt die Behandlung von Natriumdodecylsulfat (SDS) vor der Gelelektrophorese. SDS denatiert Proteine und liefert eine gleichmäßige negative Ladung des Proteins; Wenn die Anwendung des elektrischen Feldes stattfindet, wandern die Proteine basierend auf ihrem Molekulargewicht zum positiven Terminal. Bei der Trennung wird daher nur eine Eigenschaft berücksichtigt. Aus diesem Grund wird diese Methode als 1D -Gelelektrophorese bezeichnet.
Abbildung 01: 1d Gelelektrophorese
Während 1D -Gelelektrophorese werden Proteine basierend auf ihrem Molekulargewicht getrennt. In dieser Hinsicht wandern die Moleküle mit niedrigerem Gewicht im Gel schneller als die Proteine mit hohem Molekulargewicht. So bleiben Proteine mit hohem Gewicht nahe am Brunnen.
2D-Gelelektrophorese oder zweidimensionale Gelelektrophorese trennt Proteine basierend auf zwei Eigenschaften. Die beiden Eigenschaften sind der isoelektrische Punkt des Proteins und des Molekulargewichts. Diese Methode der Proteintrennung erhöht die Auflösung der Proteintrennung. Der isoelektrische Punkt des Proteins hängt vom pH-Wert ab, bei dem das Protein neutral ist.
Abbildung 02: 2D -Gelelektrophorese
Somit darf das Protein bei 2D -Gelelektrophorese auf einem festen pH -Gradienten in der ersten Dimension laufen lassen. In der zweiten Dimension werden die Proteine unter Verwendung einer vertikalen oder horizontalen Polyacrylamid -Gelelektrophorese getrennt. Somit trennen sich die Proteine nach ihrem Molekulargewicht in der zweiten Dimension.
Außerdem erhöht diese Methode zur Gelelektrophorese die Auflösung der Proteintrennung. Daher sind die getrennten Proteine reiner. Die Kosten der Technik sind jedoch viel höher als eine Dimension Gelelektrophorese.
Der Schlüsselunterschied zwischen 1D- und 2D-Gelelektrophorese besteht darin, dass 1D-Gelelektrophorese Proteine, die nur auf dem Molekulargewicht basiert. Aufgrund dieser grundlegenden Differenz zwischen 1D und 2D -Gelelektrophorese variieren die Auflösung der Trennung der Proteine und die Kosten der beiden Techniken ebenfalls. 2D -Gelelektrophorese zeigt eine hohe Auflösung als 1D -Gelelektrophorese. Die 2D -Gelelektrophorese ist jedoch teurer als 1D -Gelelektrophorese.
Die folgende Infografik fasst den Unterschied zwischen 1D und 2D -Gelelektrophorese zusammen.
Die Trennung von Proteinen basiert auf vielen Faktoren. 1D -Gelelektrophorese trennt Proteine, die nur auf dem Molekulargewicht basieren. Die zweidimensionale oder 2D -Gelelektrophorese erhöht jedoch die Auflösung der Proteintrennung. Ferner trennt die 2D-Gelelektrophorese Proteine basierend auf dem ISO-Elektrikpunkt und dem Molekulargewicht. Daher sind diese Daten für die nachgelagerte Verarbeitung von Proteinen und im Bereich der Proteomik wichtig. Dies ist daher die Zusammenfassung der Differenz zwischen 1D und 2D -Gelelektrophorese.
1. Galeva, Nadezhda und Michailaltermann. „Vergleich der eindimensionalen und zweidimensionalen Gelelektrophorese als Trennwerkzeug zur proteomischen Analyse von Rattenlebermikrosomen: Cytochrome P450 und andere Membranproteine.”Proteomics, u.S. National Library of Medicine, Juni 2002, hier erhältlich.
1. "Elektrophorese - Füllung von 1D -Gel -Brunnen mit Proteinenmischung" von Jean -Etienne Poirrier - Füllung von 1D -Gel -Brunnen mit Proteinenmischung (CC BY -SA 2.0) über Commons Wikimedia
2. "2d Electrlophoresis" vom Nationalen Institut für Gesundheit - Zentrum für Krebsforschung Nanobiologieprogramm, Nationales Institut für Gesundheit (Public Domain) über Commons Wikimedia