Unterschied zwischen BCA und Bradford Assay

Der Schlüsselunterschied zwischen BCA und Bradford Assay Ist dieser BCA-Assay zeitaufwändig und weniger genau, während der Bradford-Assay schnell und genau ist.

BCA- und Bradford -Assay sind zwei Testmethoden zur Bestimmung der Proteinkonzentration. Diese beiden Assays haben unterschiedliche Prinzipien des Assays und Unterschiede in ihren Genauigkeiten.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist BCA -Assay
3. Was ist Bradford Assay
4. BCA gegen Bradford Assay in tabellarischer Form
5. Zusammenfassung - BCA gegen Bradford Assay

Was ist BCA -Assay?

BCA -Assay oder Bicinchoninsäure -Assay ist ein biochemischer Assay, der bei der Bestimmung der Gesamtkonzentration von Protein in einer Lösung nützlich ist. Diese Methode wird auch als als benannt Smith Assay Nach seinem Erfinder Paul K. Schmied. Diese analytische Methode zeigt Ähnlichkeiten mit dem Lowry -Protein -Assay, dem Bradford -Protein -Assay oder dem Biurett -Reagenz. Wir können die Gesamtproteinkonzentration in einer bestimmten Probe durch eine Farbänderung der Probenlösung beobachten, die von grün nach lila geht. Diese Farbänderung erfolgt proportional zum Proteingehalt. Danach können wir eine colourimetrische Technik verwenden, um die Farbintensität und den Proteingehalt in der Probe zu analysieren.

BCA -Methode zur Proteinschätzung

Bei der Betrachtung des Mechanismus des BCA -Assays enthält die typische BCA -Lösung eine stark alkalische Lösung mit einem pH -Wert von fast 11.25, und die Inhaltsstoffe in dieser Lösung umfassen Bicinchoninsäure, Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat, Natriumtartrat und Kupfer (II) -Sulfat -Pentahydrat. Dieser Assay hängt hauptsächlich von zwei chemischen Reaktionen ab: der Reduktion von Kupfer (II) auf Kupfer (i) durch die Peptidbindungen in Protein und Chelat von zwei Molekülen von Bicinchoninsäure mit Kupfer (I), was zu einem lila farbigen Komplex führt, der kann kann Absorbieren Sie Licht bei einer Wellenlänge von 562 nm. In der ersten Reaktion ist die durch Peptidbindungen reduzierte Menge an Kupfer (II) proportional zur Menge an Protein in der Probe.

Was ist Bradford Assay?

Bradford -Assay ist eine spektroskopische Analysemethode, die für die Messung der Proteinkonzentration in einer Lösung nützlich ist. Diese Methode wurde von Marion M entwickelt. Bradford im Jahr 1976 und es ist eine vergleichsweise schnelle und genaue Methode.

Farbreaktion von Protein- und Bradford -Reagenz

Wir können diese Methode verwenden, um die Konzentration der Proteinmenge in einer Probe zu bestimmen. Die chemische Reaktion, die während dieses Assays in der Probe stattfindet.

Bradford -Methode zur Proteinschätzung

Bei der Betrachtung der Methode dieses Assays handelt es sich um einen colourimetrischen Protein-Assay, der auf der Absorptionsverschiebung des Farbstoffs namens Coomassie Brilliant Blue G-250 basiert. Im Allgemeinen existiert dieser Farbstoff in drei Formen als anionische (blaue) Form, neutrale (grüne) Form und kationische (rote) Form. Daher verändert der Farbstoff unter sauren Bedingungen seine Farbe von rot nach blau. Dies liegt an der Bindung des Proteins mit dem Farbstoff. Im Gegensatz dazu erscheint die Lösung eine rotbraune Farbe. Dieser Farbstoff ist in der Lage, einen starken, nichtkovalenten Komplex mit der Carboxylgruppe des Proteins durch Van der Waal -Kräfte und elektrostatische Anziehungskräfte zu bilden.

Was ist der Unterschied zwischen BCA und Bradford Assay?

BCA- und Bradford -Assay sind zwei Testmethoden zur Bestimmung der Proteinkonzentration. Diese beiden Assays haben unterschiedliche Prinzipien des Assays und Unterschiede in ihren Genauigkeiten. Der Hauptunterschied zwischen BCA und Bradford Assay besteht darin, dass BCA-Assay zeitaufwändig und weniger genau ist, während der Bradford-Assay schnell und genau ist.

Die folgende Infografik fasst die Unterschiede zwischen BCA und Bradford Assay in tabellarer Form zusammen.

Zusammenfassung -BCA gegen Bradford Assay

BCA -Assay oder Bicinchoninsäure -Assay ist ein biochemischer Assay, der bei der Bestimmung der Gesamtkonzentration von Protein in einer Lösung nützlich ist. Bradford -Assay ist eine spektroskopische Analysemethode, die für die Messung der Proteinkonzentration in einer Lösung nützlich ist. Der Hauptunterschied zwischen BCA und Bradford Assay besteht darin, dass BCA zeitaufwändig und weniger genau ist, während der Bradford-Assay schnell und genau ist.

Referenz:

1. „Bradford Protein Assay.Experimentelle Biosciences, Rice University.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Bradford Protein Assay" von Helito - eigener Arbeit (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia
2. "BSA Standard Curve" von Alexieogo - eigene Arbeit (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia