Unterschied zwischen direkter und indirekter ELISA
Schlüsselunterschied - direkt gegen indirekte Elisa
Ein enzymgebundener Immunoassay (ELISA), auch als Enzym-Immunoassay bekannt, ist ein serologischer Test, der Antikörper im Blut erkennt. Es wird als diagnostisches Instrument verwendet, um herauszufinden, ob der Patient einer bestimmten Art von Virus oder einem anderen Infektionsmittel (Antigen) ausgesetzt wurde und ob der Körper Antikörper gegen die Infektion produziert hat. ELISA kann auch die vergangenen und aktuellen Infektionen identifizieren. Daher wird ELISA häufig als Prescreening-Test von den Ärzten vor der eingehenden Analyse von Krankheiten verwendet. Dieser Test kann im Labor durchgeführt werden, indem der Patient eine Blutprobe entnimmt. Es gibt zwei Arten von ELISA -Tests: Direkte Elisa und indirekte Elisa. Der Hauptunterschied zwischen direkter und indirekter ELISA ist das Die indirekte ELISA ist empfindlicher und erfordert die Zugabe eines sekundären Antikörpers während Direkte Elisa ist weniger empfindlich und verwendet nur einen primären Antikörper.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist direkt Elisa
3. Was ist indirekte Elisa
4. Seite an Seitenvergleich - direkt gegen indirekte Elisa
5. Zusammenfassung
Was ist direkt Elisa?
ELISA ist ein diagnostischer Krankheitstest, der durchgeführt wurde, um das Vorhandensein bestimmter Antigene oder Antikörper im Blut zu identifizieren. Es wird als Platten -Assay durchgeführt. Es verwendet Antikörper, die mit leicht getesteten Enzymen verbunden sind. Vorhandensein von Antigenen in der Serumprobe binde mit spezifischen Antikörpern, die mit Enzymen verbunden sind. Im letzten Schritt wird ein bestimmtes Substrat hinzugefügt, um mit dem Enzym zu reagieren. Das Enzym umwandelt das Substrat in ein farbiges oder signalproduzierendes Produkt um. Die Farbänderung im chemischen Substrat zeigt das Vorhandensein eines bestimmten Antikörpers in der Serumprobe. Direct ELISA -Test verwendet nur einen primären Antikörper, der mit dem Enzym verbunden ist. Nach der Bindung an das Antigen verändert es schnell die Farbe, was auf das Vorhandensein des infektiösen Mittel im Blut hinweist. Die Intensität der Signale ist jedoch in direkter ELISA schwächer, da die Epitope auf die Bindung der Antigene beschränkt sind. Daher ist direkter ELISA im Vergleich zu indirekter ELISA weniger empfindlich.
Abbildung 01: Direkter ELISA -Test
Was ist indirekte Elisa?
ELISA kann mit zwei Arten von Antikörpern durchgeführt werden, nämlich; primärer Antikörper und sekundärer Antikörper. Das indirekte ELISA -Tool verwendet beide Arten von Antikörpern, um die Signale zur besseren Erkennung zu verstärken. Die indirekte ELISA -Technik wird wie folgt durchgeführt.
- Platten werden mit Antigenen inkubiert und gewaschen, um die unspezifische Bindung zu blockieren.
- Dann werden primäre Antikörper zugegeben und gewaschen.
- Enzymgebundener sekundärer Antikörper werden zugegeben und gewaschen.
- Es wird ein Substrat zugegeben und mit Enzymen reagieren.
- Signale werden festgestellt, und das Vorhandensein oder Fehlen des spezifischen Antigens in der Probe wird identifiziert.
Im indirekten ELISA -Test können mehrere sekundäre Antikörper an einen einzelnen primären Antikörper binden. Sekundäre Antikörper sind mit leicht getesteten Enzymen verbunden. Daher kann eine Bindung aufgrund von mehr als einer Wechselwirkungen ein starkes Signal verursachen. Daher ist die indirekte Elisa empfindlicher als die direkte Elisa. Indirekte ELISA kann jedoch aufgrund von Kreuzreaktionen der sekundären Antikörper unspezifische Signale machen.
Abbildung 02: Indirekter ELISA -Test
Was ist der Unterschied zwischen direkter und indirekter Elisa?
Direkt gegen indirekte Elisa | |
| Direct ELISA ist im Vergleich zu indirekter ELISA weniger empfindlich. | Die indirekte Elisa ist empfindlicher. |
| Zeit genommen | |
| Direkter ELISA -Test ist ein schneller Prozess. | Die indirekte Elisa ist zeitaufwändig. |
| Verwendung von Antikörpern | |
| In direkter ELISA werden nur eine Art von Antikörpern (primäre Antikörper) verwendet. | Für indirekte ELISA werden primäre und sekundäre Antikörper verwendet. |
| Link mit Enzymen | |
| Primäre Antikörper sind mit Enzymen verbunden. | Sekundärantikörper sind mit Enzymen verbunden. |
| Kreuzreaktivität der zweiten Antikörper | |
| Direct ELISA eliminiert die Kreuzreaktivität von zweiten Antikörpern. | Die indirekte ELISA ist von der Kreuzreaktivität von zweiten Antikörpern betroffen. |
| Signale | |
| Signale sind im Vergleich zu indirekter ELISA schwach. | Signale werden in indirekter ELISA verstärkt. Daher ist es leicht zu erkennen. |
Zusammenfassung -Direkt gegen indirekte Elisa
ELISA ist eine biochemische Technik. Es kann über zwei Prozesse durchgeführt werden, die als direkte oder indirekte ELISA bezeichnet werden. Direkter ELISA -Test verwendet nur primäre Antikörper, um das Antigen zu erkennen, während indirekte ELISA sowohl primäre als auch sekundäre Antikörper verwendet. In direkter ELISA werden primäre Antikörper markiert, während in indirekten ELISA -Sekundärantikörpern markiert werden. Dies ist der Unterschied zwischen direkter und indirekter ELISA.
Verweise
1.”Der enzymgebundene Immunosorbent-Assay (ELISA).Bulletin der Weltgesundheitsorganisation. U.S. National Library of Medicine, 1976. Netz. 29 März. 2017
2. Loon, a. M van, j. T van der logt, f. W. HEESSEN und J. Van der Veen. „Enzymgebundener Immunosorbent-Assay, der markiertes Antigen zum Nachweis von Immunglobulin M und Antikörpern bei Toxoplasmose verwendet.Journal of Clinical Microbiology. U.S. National Library of Medicine, Juni 1983. Netz. 29 März. 2017
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "Elisa Diagramm" von Cavitri - eigene Arbeit (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
2. "Indirect Elisa" von Cawang - eigene Arbeit (CC0) über Commons Wikimedia
