Elektrophorese gegen Elektroosmose
Physikalische Trennungsmethoden wie Filterung, Destillation und Säulenchromatographie sind keine einfachen Methoden, wenn einige Moleküle die Trennung eingehen. Elektrophorese und Elektro-Osmose sind zwei weitere Trennungstechniken, mit denen geladene Partikel getrennt werden können.
Was ist Elektrophorese?
Elektrophorese ist eine Technik, Moleküle basierend auf ihren Größen zu trennen. Grundlegend für diese Trennung ist die Ladung des Moleküls und ihre Fähigkeit, sich in einem elektrischen Feld zu bewegen. Dies ist die häufigste und Haupttechnik in der molekularen Biologie, um Moleküle zu trennen, insbesondere DNA und Proteine. Dies wird meistens verwendet, weil es relativ einfach und kostengünstig ist. Die Apparatur für die Elektrophorese kann etwas kompliziert sein, und die Vorbereitung dauert einige Zeit. Aber wir können leicht einen Elektrophorese -Apparat aus den Dingen machen, die wir im Labor haben. Elektrophorese -Techniken können je nach den Zwecken variieren. Wir können eine dimensionale Elektrophorese zur Trennung von DNA oder Protein verwenden. Es wird eine zweidimensionale Elektrophorese verwendet, wenn mehr aufgelöste Proben erforderlich sind (wie im Fall von Fingerdruck). Ein Gel wird als Stützmedium verwendet, um die Moleküle zu trennen. Dieses Gel kann als flache Blätter oder in Röhrchen zubereitet werden. Die Basis dieses Verfahrens besteht darin, Moleküle abhängig von ihrer Bewegungsrate durch ein Gel zu trennen, wenn ein elektrisches Feld geliefert wird. Negativ geladene Moleküle wie DNA tendieren dazu, in diesem elektrischen Feld in Richtung des positiven Pols zu gelangen, während positiv geladene Moleküle dazu neigen, zum negativen Pol zu reisen. Zwei Arten von Gelen werden in der Elektrophorese als Agarose und Polyacrylamid verwendet. Diese beiden haben unterschiedliche Auflösungsbefugnisse. Das Gel wirkt als Sieb, um die verschiedenen Größen von Molekülen zu filtern. Die im Gel festgelegten elektrostatischen Ladungen dienen als Kraft.
Die Trennung hängt von der Mobilität der Ionen ab.
F = fv = Zee
V = Zee/ f
F = Kraft, die auf ein Teilchen wirkt
F = Reibungskoeffizient
V = durchschnittliche migrierende Geschwindigkeit
Z = Ladung des wandernden Partikels
E = Elementarladung
E = Stärke des elektrischen Feldes
Die notwendigen Bedingungen für die Elektrophorese sind relativ einfach. Beim Herstellen des Gels und beim Ausführen der Probe wird ein Puffer verwendet. Marker und Farbstoffe werden für die Visualisierungszwecke verwendet.
Was ist Elektro-Osmose?
Dies ist der Prozess des Bewegens einer Flüssigkeit durch ein Material mit einem angelegten elektrischen Feld. Die Bewegung kann durch ein poröses Material entlang einer Kapillare, Membran usw. erfolgen. Dies kann als Trennungstechnik (insbesondere Kapillarelektro-Osmose) verwendet werden. Die Geschwindigkeit der Flüssigkeit ist linear proportional zum angelegten elektrischen Feld. Es hängt auch vom Material ab, das zum Erstellen des Kanals und der verwendeten Lösung verwendet wird. In der Grenzfläche haben Lösung und Material entgegengesetzte Ladungen erhalten, und dies wird als elektrische Doppelschicht bezeichnet. Wenn ein elektrisches Feld auf die Lösung angewendet wird, bewegt sich die elektrische Doppelschicht durch die resultierende Coulomb -Kraft. Dies ist als elektroosmotischer Fluss bekannt.
Was ist der Unterschied zwischen Elektrophorese und Elektro-Osmose? • Bei der Elektrophorese werden feste Partikel (Makromoleküle wie Nukleinsäuren oder Proteine) unter Verwendung eines elektrischen Feldes bewegt. Aber bei Elektro-Osmose bewegt sich eine Flüssigkeit. • Bei der Elektrophorese ist das Stützmaterial ein Gel. Aber es Elektro-Osmose kann ein Gel, eine Membran, ein Kapillar usw. sein. |