Unterschied zwischen Elektroporation und Mikroinjektion

Der Schlüsselunterschied Zwischen Elektroporation und Mikroinjektion befindet sich das Die Elektroporation ist eine Technik, die einen hochspannenden elektrischen Impuls verwendet, um DNA in Wirtszellen zu liefern, während eine Mikroinjektion eine Technik ist, die eine feinstöckige Glasnadel oder Mikropipette verwendet, um DNA in Wirtszellen zu liefern.

Transformation ist der Prozess, durch den fremde DNA auf Wirtszellen übertragen wird. Durch Transformation kann die genetische Zusammensetzung des Organismus verändert werden. Es gibt verschiedene chemische, biologische und physikalische Transformationsmethoden. Einige sind direkte Methoden, während einige indirekte Methoden sind. Elektroporation und Mikroinjektion sind zwei physikalische Methoden, die direkte Transformationsmethoden sind. Die Elektroporation verwendet ein elektrisches Feld, um mikroskopische Poren in biologischen Zellmembranen zu induzieren, um DNA in Wirtszellen einzubauen. Die Mikroinjektion hingegen liefert direkt DNA mit einer Mikropipette oder einer feinspippten Glasnadel.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Elektroporation 
3. Was ist Mikroinjektion
4. Ähnlichkeiten zwischen Elektroporation und Mikroinjektion
5. Seite für Seitenvergleich - Elektroporation gegen Mikroinjektion in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Elektroporation?

Die Elektroporation ist eine Transformationstechnik, die DNA in Pflanzenzellen und Protoplasten liefert. Diese Technik verwendet einen elektrischen Hochspannungsimpuls. Pflanzenmaterialien werden in einer Pufferlösung mit DNA inkubiert. Dann wird die Lösung einem elektrischen Hochspannungsimpuls ausgesetzt. Hochspannungsinduzierte Poren werden in Pflanzenzellmembranen erzeugt, und durch diese Poren wandert DNA in die Zellen aus und integriert sich in genomische Pflanzen -DNA. Die Effizienz dieser Methode hängt von Pflanzenmaterialien und Behandlungsbedingungen ab.

Abbildung 01: Elektroporation

Wenn die Transformation unter Verwendung von Elektroporation durchgeführt wird, erhalten nur 40 bis 50 % der Zellen DNA. Darüber hinaus können nur 50 % der transformierten Zellen nach dieser Methode überleben. Diese Methode ist jedoch leicht durchzuführen und verändert die biologische Struktur oder Funktion von Zellen nicht. Darüber hinaus kann es für eine Vielzahl von Zellen verwendet werden.

Was ist Mikroinjektion?

Mikroinjektion ist eine Transformationstechnik, die besonders nützlich ist, wenn DNA in große Zellen eingeführt wird. Diese Methode verwendet eine feinstöckige Glasnadel oder eine Mikropipette, um DNA in pflanzliche Protoplasten oder tierische Zellen (Oozyten, Eier und Embryonen) zu versorgen, um DNA zu liefern. Tatsächlich ist diese Methode besser geeignet, um transgene Tiere wie Mäuse herzustellen. Bei dieser Methode wird DNA direkt in den Kern oder das Zytoplasma eingebaut.

Ähnlich wie bei der Elektroporation ist die Mikroinjektion eine direkte Transformationstechnik. Mikroinjektion wird unter einem spezialisierten Mikroskop -Setup durchgeführt. Computergesteuerte Steuerung von Pipette, Nadel, Mikroskopstufe und Videotechnologie hat die Wirksamkeit dieser Technik erhöht. Bei der Injektion von DNA kann ein Farbstoff verwendet werden, um transformierte Zellen leicht zu identifizieren. Daher besteht nicht erforderlich, eine separate Methode zu verwenden, um transformierte Zellen zu identifizieren. Am wichtigsten ist, dass das Mikroinjektionsverfahren kein Marker -Gen erfordert.

Abbildung 02: Mikroinjektion

Darüber hinaus ist diese Methode sehr effektiv und reproduzierbar. Diese Methode ist jedoch kostspielig, zeitaufwändig und benötigte qualifizierte persönliche persönliche. Außerdem kann nur eine kleine Anzahl von Zellen mit dieser Methode behandelt werden.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Elektroporation und Mikroinjektion?

• Sowohl die Elektroporation als auch die Mikroinjektion sind zwei Arten von Transformationstechniken.
• Diese Methoden liefern DNA in Pflanzenzellen und Protoplasten.
• Sie sind direkte Methoden.
• Darüber hinaus sind sie physikalische oder mechanische Methoden.
• Beide Methoden sind hilfreich, wenn sie transgene Pflanzen und Tiere produzieren.

Was ist der Unterschied zwischen Elektroporation und Mikroinjektion?

Die Elektroporationstechnik verwendet ein elektrisches Feld, um DNA einzuführen, während die Mikroinjektionstechnik eine Mikropipette oder eine feine Glasnadel zur Einführung von DNA ist. Dies ist daher der Schlüsselunterschied zwischen Elektroporation und Mikroinjektion. Darüber hinaus wird die Elektroporation hauptsächlich für Pflanzenzellen und Protoplasten verwendet, während Mikroinjektion hauptsächlich für tierische Zellen verwendet wird. Außerdem ist die Elektroporation nicht so zeitaufwändig wie Mikroinjektion.

Die folgende Infografik fasst die Unterschiede zwischen Elektroporation und Mikroinjektion in tabellarischer Form zusammen.

Zusammenfassung -Elektroporation gegen Mikroinjektion

Elektroporation und Mikroinjektion sind zwei physikalische Methoden des Gentransfers. Die Elektroporation verwendet ein hochspannendes elektrisches Feld, während die Mikroinjektion eine Glasnadel oder eine Mikropipette verwendet. Dies ist daher der Schlüsselunterschied zwischen Elektroporation und Mikroinjektion. Beide Methoden führen jedoch direkt exogene DNA in Wirtszellen ein.

Referenz:

1. „Elektroporation.”Thermo Fisher Scientific - USA, hier erhältlich.
2. „Cistron.Sciencedirect -Themen, die hier erhältlich sind.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Elektroporationsdiagramm" von Zephyris (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. "Mikroinjektion eines menschlichen Ei" von KDS444 - eigene Arbeit (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia