Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACs

Schlüsselunterschied - Durchflusszytometrie gegen FACS

Im Kontext der Zelltheorie sind Zellen die grundlegende strukturelle und funktionelle Einheit aller lebenden Organismen. Die Zellsortierung ist eine Methodik, die verwendet wird, um verschiedene Zellen entsprechend den physiologischen und morphologischen Merkmalen zu trennen. Sie können von intrazellulären oder extrazellulären Eigenschaften sein. Die Wechselwirkung von DNA, RNA und Proteinen gelten als intrazelluläre interaktive Eigenschaften, während Form, Größe und verschiedene Oberflächenproteine ​​als extrazelluläre Eigenschaften angesehen werden. In der heutigen Wissenschaft hat die Zellsortiermethoden dazu geführt, die unterschiedlichen Untersuchungen in biologischen Studien und auch bei der Einrichtung neuer Prinzipien durch die Forschung zur Medizin zu unterstützen. Die Zellsortierung wird an verschiedenen Methoden durchgeführt, die sowohl primitive Geräte als auch fortschrittliche technologische Methoden unter Verwendung von ausgefeilter Maschinerie umfassen. Durchflusszytometrie, fluoreszierende aktivierte Zellsortierung (FACS), Magnetzellauswahl und Einzelzellsortierungen sind die angewendeten Hauptmethoden. Durchflusszytometrie und FACs werden entwickelt, um Zellen gemäß ihren optischen Eigenschaften zu unterscheiden. FACS ist eine spezielle Art von Durchflusszytometrie. Durchflusszytometrie ist eine Methodik, die während der Analyse einer heterogenen Population von Zellen gemäß verschiedenen Zelloberflächenmolekülen, Größe und Volumen verwendet wird, was die Untersuchung einzelner Zellen ermöglicht. FACS ist ein Prozess, durch den eine Probenmischung von Zellen nach ihrer Lichtstreuung und Fluoreszenzeigenschaften in zwei oder mehr Behälter sortiert wird. Dies ist das Schlüsselunterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACs.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist die Durchflusszytometrie
3. Was ist FACS
4. Ähnlichkeiten zwischen Durchflusszytometrie und FACs
5. Seite für Seitenvergleich - Durchflusszytometrie gegen FACs in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist die Durchflusszytometrie?

Durchflusszytometrie ist eine Methode, mit der die Expression intrazellulärer Moleküle und die Zelloberfläche untersucht und bestimmen und verschiedene Zelltypen definiert und charakterisiert werden. Es wird auch verwendet, um das Zellvolumen und die Zellgröße zu bestimmen und die Reinheit von Subpopulationen zu bewerten, die isoliert sind. Dies ermöglicht die Multi-Parameter-Bewertung einzelner Zellen ungefähr zur gleichen Zeit. Durchflusszytometrie wird zur Messung der Fluoreszenzintensität verwendet, die aufgrund von fluoreszenz markierten Antikörpern erzeugt wird, die zur Identifizierung von Proteinen oder Liganden beitragen.

Abbildung 01: Durchflusszytometrie

Im Allgemeinen umfasst die Durchflusszytometrie hauptsächlich drei Subsysteme. Sie sind die Fluidik, die Elektronik und die Optik. In der Durchflusszytometrie stehen fünf Hauptkomponenten zur Verfügung, die bei der Zellsortierung verwendet werden. Sie sind eine Strömungszelle (ein Flüssigkeitsstrom, der verwendet wird, um sie zu transportieren und die Zellen für den optischen Erfassungsverfahren auszurichten), ein Messsystem (kann von verschiedenen Systemen sein, einschließlich Quecksilber- und Xenonlampen, mit Wassergekühlt oder Hochleistungsstrom- oder Hochleistungs-Wasser- oder luftgekühlte Laser oder Diodenlaser mit geringer Leistung), ein ADC; Analog -zu digitales Konvertersystem, Verstärkungssystem und ein Computer zur Analyse. Die Akquisition ist der Prozess, durch den die Daten unter Verwendung des Durchflusszytometers aus den Proben gesammelt werden. Dieser Prozess wird durch einen Computer vermittelt, der mit dem Durchflusszytometer verbunden ist. Die im Computer vorhandene Software analysiert die Informationen, die vom Durchflusszytometer an den Computer gespeist werden. Die Software hat auch die Fähigkeit, Parameter des Experiments anzupassen, das das Durchflusszytometer steuert.

Was ist FACS?

Im Kontext der Durchflusszytometrie, Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung (FACS) ist eine Methode, die zur Differenzierung und Sortierung einer Probe einer Mischung biologischer Zellen verwendet wird. Die Zellen sind von zwei oder mehr Behälter getrennt. Die Sortiermethode basiert auf den physikalischen Merkmalen der Zelle, die Lichtstreuung und Fluoreszenzeigenschaften der Zelle umfassen. Dies ist eine wichtige wissenschaftliche Technik, die verwendet werden kann, um zuverlässige quantitative und qualitative Ergebnisse von Fluoreszenzsignalen zu erzielen, die aus jeder Zelle emittiert werden. Während FACS ist zunächst das vorgespannte Gemisch von Zellen; Eine Federung wird in die Mitte eines schmalen Flüssigkeitsstroms gerichtet, der schnell fließt. Der Flüssigkeitsfluss wird ausgelegt, um die Zellen in der Suspension basierend auf dem Durchmesser jeder Zelle zu trennen. Ein Schwingungsmechanismus wird auf den Sperrstrom angewendet, der zur Bildung einzelner Tröpfchen führt.

Abbildung 02: FACS

Das System wird kalibriert, um ein einzelnes Tröpfchen mit einer Zelle zu erstellen. Kurz vor der Bildung von Tröpfchen bewegt sich die Strömungssuspension entlang einer Fluoreszenzmessgeräte, die die Fluoreszenz charakteristisch für jede Zelle erkennt. An der Bildung von Tröpfchen wird ein elektrischer Ladering platziert, der vor der Messung der Intensität der Fluoreszenz eine Ladung zum Ring induziert wird. Sobald die Tröpfchen aus dem Aufhängungsstrom gebildet sind. Gemäß der Ladung leitet das System die Tröpfchen in verschiedene Behälter um. Die Anwendungsmethode der Ladung variiert je nach verschiedenen in FACS verwendeten Systemen. Das in FACS verwendete Geräte ist als fluoreszenzaktiviertes Zellsortierer bekannt.

Was ist die Ähnlichkeit zwischen Durchflusszytometrie und FACs?

• Durchflusszytometrie und FACs werden entwickelt, um Zellen gemäß ihren optischen Eigenschaften zu unterscheiden.

Was ist der Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACs?

Zusammenfassung -Fluss Zytometrie gegen FACS

Die Zelle ist die grundlegende strukturelle und funktionelle Einheit aller lebenden Organismen. Die Zellsortierung ist der Prozess, durch den Zellen basierend auf ihren intrazellulären und extrazellulären Eigenschaften isoliert und in verschiedene Kategorien differenziert werden. Durchflusszytometrie und FACs sind zwei wichtige Methoden bei der Zellsortierung. Beide Prozesse werden entwickelt, um Zellen nach ihren optischen Eigenschaften zu unterscheiden. Durchflusszytometrie ist eine Methodik, die während der Analyse einer heterogenen Population von Zellen gemäß verschiedenen Zelloberflächenmolekülen, Größe und Volumen verwendet wird, was die Untersuchung einzelner Zellen ermöglicht. FACS ist ein Prozess, durch den eine Probenmischung von Zellen nach ihrer Lichtstreuung und Fluoreszenzeigenschaften in zwei oder mehr Behälter sortiert wird. Dies ist der Unterschied zwischen Durchflusszytometrie und FACs.

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Referenz:

1. Durchflusszytometrie (FCM) /FACS | Fluoreszenz-aktivierte Zellsortierung (FACS). Zugriff 22 September. 2017. Hier verfügbar
2. Ibrahim, Sherrif F., und Ger van den Engh. „Durchflusszytometrie und Zellsortierung.Springerlink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. Januar. 1970… Zugriff auf den 22. September. 2017. Hier verfügbar

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. 'Cytometer'by Kierano - eigene Arbeit (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
2. 'Fluoreszenz unterstützte Zellsortierung (FACS) B'By Sarisabban - Sabban, Sari (2011) Entwicklung eines In -vitro -Modellsystems zur Untersuchung der Wechselwirkung von Equus caballus igE mit seinem FCεRI -Rezeptor mit hoher Affinität (PhD -These), der Universität von Sheffield , (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia