Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS -Seite
Schlüsselunterschied - Gelelektrophorese gegen SDS -Seite
Gelelektrophorese ist eine Technik, die Makromoleküle in einem elektrischen Feld trennt. Es ist eine gemeinsame Methode in der molekularen Biologie, DNA, RNA und Proteine von Gemischen gemäß ihren molekularen Größen zu trennen. Die SDS -Seite ist eine Art von Gelelektrophorese, mit der Proteine von einem Proteingemisch basierend auf ihren Größen trennen. Gelelektrophorese ist ein Begriff während Die SDS -Seite ist eine Art von Gelelektrophorese. Dies ist der Hauptunterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS -Seite.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Gelelektrophorese
3. Was ist SDS -Seite
4. Seite an Seite Vergleich - Gelelektrophorese gegen SDS -Seite
5. Zusammenfassung
Was ist Gelelektrophorese?
Gelelektrophorese ist eine gemeinsame Technik, die in Laboratorien verwendet wird, um geladene Moleküle wie DNA, RNA, Proteine usw. zu trennen. aus ihren Gemischen. Ein Gel wird bei Gelelektrophorese verwendet. Es wirkt als molekularer Sieb. Bei Gelelektrophorese werden zwei Arten von Gelen verwendet, nämlich Agarose und Polyacrylamid. Auswahl eines Gel- und Gelvorbereitung sind wichtige Faktoren, die in Gelelektrophorese berücksichtigt werden müssen, da die Porengröße des Gels sorgfältig manipuliert werden sollte, um eine gute Trennung von Molekülen durch Gelelektrophorese zu treten. Gelelektrophorese hat ein elektrisches Feld an zwei Enden des Gels angeschlossen. Ein Ende des Gels zeigt eine positive Ladung, während das andere Ende negativ aufgeladen ist.
DNA und RNA sind negativ geladene Moleküle. Sobald sie vom negativen Ende des Gels in das Gel geladen und auf das elektrische Feld angewendet werden, wandern sie durch die Gelporen in Richtung des positiv geladenen Endes des Gels. Die Geschwindigkeit der Migration hängt von der Ladung und der Größe des Moleküls ab. Kleinere Moleküle wandern leicht durch die Gelporen als größere Moleküle. Daher reisen kleinere Moleküle eine lange Entfernung durch das Gel und die größeren Moleküle reisen eine kurze Strecke. Um das Reisen von Molekülen auf dem Gel zu beobachten, werden spezielle Farbstarten verwendet. Das elektrische Feld wird für einen bestimmten Zeitraum angewendet und angehalten, um den Verlust von Molekülen zu verhindern und die Moleküle an ihren bewegten Positionen zu halten. Im Gel können verschiedene Banden beobachtet werden. Diese Banden repräsentieren die Moleküle verschiedener Größen. Daher ist Gelelektrophorese nützlich, um Moleküle nach ihren Größen zu unterscheiden.
Gelelektrophorese ist in verschiedene Techniken als präparative Technik in der Molekularbiologie wie PCR, RFLP, Klonierung, DNA -Sequenzierung, Southern Blot, Genom Mapping usw. eingebaut.
Abbildung 01: Agarosegelelektrophorese
Was ist SDS -Seite?
Natriumdodecylsulfat -Polyacrylamid -Gelelektrophorese (SDS -Seite) ist eine Art von Gelelektrophorese, die zum Trennen von Proteinen verwendet wird. Wenn Gelelektrophorese zur Trennung von Proteinen verwendet wird, sind spezielle Behandlungen erforderlich, da Proteine nicht negativ wie DNA und RNA geladen werden und nicht zum positiven Ende oder zum negativen Ende wandern. Daher werden Proteine denaturiert und mit einer negativen Ladung vor der Gelelektrophorese beschichtet. Es erfolgt unter Verwendung eines Waschmittels namens Natriumdodecylsulfat (SDS). Die Gelelektrophorese, die SDS und ein Polyacrylamidgel für das Stützmedium verwendet, ist als SDS -Seite bekannt. Diese Technik wird üblicherweise in Biochemie, Genetik, Forensik und Molekularbiologie verwendet.
Während der SDS -Seite werden Proteine mit SDS gemischt. SDS entfaltet Proteine in eine lineare Form und überduft sie mit einer negativen Ladung, die proportional zu ihrer Molekülmasse ist. Aufgrund der negativen Ladung wandern Proteinmoleküle in Richtung des positiven Ladungsende des Gels und trennt sich nach ihren Molekülmassen. Auf der SDS -Seite wird Polyacrylamid als solide Unterstützung für das Gel verwendet. Die tatsächliche Trennung der Proteine hängt hauptsächlich von den Eigenschaften des Gels ab. Daher sollte die Vorbereitung von Polyacrylamid -Gel sorgfältig durchgeführt werden und es sollte korrekte Konzentrationen von Polyacrylamid verwendet werden. Polyacrylamidgele zeigen eine hohe Auflösung als Agarosegele. Daher wird die SDS-Seite als hochauflösende Technik für die Proteintrennung angesehen.
Die SDS -Seite ist eine Art Denaturierungs -Gelelektrophorese. Es hat eine große Einschränkung der Proteinanalyse. Da SDS vor der Trennung Proteine denatiert, erlaubt es nicht den Nachweis der enzymatischen Aktivität, Proteinbindungswechselwirkungen, Protein -Cofaktoren usw.
Abbildung 02: SDS -Seite
Was ist der Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS -Seite?
Gelelektrophorese gegen SDS -Seite | |
| Gelelektrophorese ist eine Methode, um Makromoleküle mit einem elektrischen Feld zu trennen. | Die SDS-Seite ist eine hochauflösende Gelelektrophorese-Technik, mit der Proteine basierend auf ihrer Masse trennen. |
| Gellauf | |
| Es kann horizontal oder vertikal durchgeführt werden. | Die SDS -Seite wird immer vertikal ausgeführt. |
| Grundlage für die Trennung | |
| Die Trennung erfolgt nach Ladung und Größe. | Proteintrennung tritt gemäß Masse und Ladung auf. |
| Auflösung | |
| Agarosegelelektrophorese hat eine geringe Auflösung und Polyacrylamid -Gelelektrophorese hat eine höhere Auflösung | Die SDS -Seite hat eine bessere Lösung. |
| Denaturierung | |
| Gelelektrophorese umfasst sowohl Denaturier- als auch nicht -Denaturierende Techniken. | SDS -Seite Denatiert Proteine vor der Trennung. |
Zusammenfassung -Gelelektrophorese gegen SDS -Seite
Gelelektrophorese ist eine gemeinsame Technik, die zur Trennung und Analyse von DNA, RNA und Proteinen basierend auf ihrer Größe und Ladung verwendet wird. Es gibt zwei Haupttypen von Gelelektrophorese, nämlich Agarosegelelektrophorese und Polyacrylamid -Gelelektrophorese. Agarosegele werden hauptsächlich zur Trennung von Nukleinsäure verwendet. Wenn eine höhere Auflösung erforderlich ist, werden Polyacrylamidgele verwendet. Die SDS -Seite ist eine Art von Gelelektrophorese, die üblicherweise verwendet wird, um komplexe Gemische von Proteinen zu trennen. Es wird als hochauflösende Protein-Trennungstechnik angesehen. Dies ist der Unterschied zwischen Gelelektrophorese und SDS -Seite.
Verweise:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig und David H. Peting. „Native SDS-PAGE: Elektrophoretische Trennung von Proteinen mit hoher Auflösung nativer Eigenschaften, einschließlich gebundener Metallionen. www.NCBI.NLM.NIH.Regierung. N.P., Mai 2014. Netz. 7 Apr. 2017
2. Stellmagen, Nancy C. „Elektrophorese von DNA in Agarosegelen, Polyacrylamidgelen und in freier Lösung.Elektrophorese. U.S. National Library of Medicine, Juni 2009. Netz. 07 Apr. 2017
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "GelelelektrophoreseApparatur" (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
2. "DNA Agarose Gel -Elektrophorese" von School of Natural Resources von Ann Arbor - DNA Lab (CC von 2.0) über Commons Wikimedia
