Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran
Schlüsselunterschied - Nitrocellulose gegen Nylonmembran
Blotting ist eine wichtige Technik zum Nachweis spezifischer Sequenzen von DNA, RNA und Proteinen aus ihren Gemischen in der molekularen Biologie. Es geschieht mit einer Membran namens Blot. Es gibt verschiedene Blottechniken wie Nord-, Süd- und Western Blotting. Die Auswahl einer ordnungsgemäßen Membran für den Blot -Prozess sollte sorgfältig durchgeführt werden, um unspezifische Bindung und falsche Erkennungen zu verhindern. Nitrocellulose, Nylon und PVDF werden häufig verwendete Membranen in Blottechniken verwendet. Sie haben unterschiedliche Eigenschaften. Der Schlüsselunterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran ist das Nitrocellulosemembranen haben ein starkes Protein -Immobilisierungspotential wohingegen Nylonmembranen haben ein hohes Nukleinsäure -Immobilisierungspotential. Beide Arten von Membranen werden jedoch häufig bei Blottechniken verwendet.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist eine Nitrocellulosemembran
3. Was ist eine Nylonmembran
4. Seite an Seitenvergleich -Nitrocellulose gegen Nylonmembran
5. Zusammenfassung
Was ist eine Nitrocellulosemembran?
Die Nitrocellulosemembran ist ein häufig verwendeter Membranfilter in Nukleinsäure- und Proteinblottechniken. Es hat ein starkes Proteinbindungspotential. Daher werden Nitrocellulosemembranen in der Western -Blot -Technik häufig eingesetzt. Nitrocellulosemembranen sind mit allen Hybridisierungstechniken kompatibel und zeigen überlegene Bindungskapazitäten ohne Störungen. Nitrocellulosemembranen sind natürlich hydrophiler Natur. Sie machen hydrophile Wechselwirkung mit Molekülen und immobilisieren sie effizient auf die Membran. Kommerzielle Nitrocellulosemembranen sind in zwei Porengrößen erhältlich: 0.45 und 0.2 µm.
Abbildung 01: Nitrocellulosemembran, die im Western Blot verwendet wird
Was ist eine Nylonmembran?
Nylonmembran ist eine andere Art von kommerzieller Membran, die bei Blottechniken verwendet wird. Es wird alternativ mit Nitrocellulosemembranen für Süd- und Nordblot verwendet. Nylonmembranen sind ideal für das südliche Blot als Nitrocellulose aufgrund ihrer hohen Affinität zur Bindung mit DNA. Aufgrund mehrerer einzigartiger Merkmale von Nylonmembranen verwenden Forscher üblicherweise Nylonmembranen für Süd- und Nordblot, anstatt über Nitrocellulosemembran. Nylonmembranen werden im Gegensatz zu Nitrocellulose ebenfalls zum Strippen und Wiederholungsverfahren empfohlen.
Abbildung 02: Nylonmembran, die für Southern Blot verwendet wird
Was ist der Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran?
Nitrocellulose gegen Nylonmembran | |
| Nitrocellulosemembranen sind spröde. | Nylonmembranen sind weniger spröde. |
| Handhabung | |
| Sie sind schwer zu handhaben. | Sie sind leicht zu handhaben. |
| Reproping | |
| Nicht unterstützte Nitrocellulosemembranen sind schwer zu täuschen. | Reproping ist bei Nylonmembranen einfach. |
| Kompatibilität mit verschiedenen Speicherbedingungen | |
| Nitrocellulosemembranen haben weniger Kraft, verschiedenen Speicherbedingungen standzuhalten. | Nylonmembranen reagieren robuster auf verschiedene Speicherbedingungen. |
| Verwenden | |
| Vorwälzung ist erforderlich. | Für Nylonmembranen ist nicht erforderlich. |
| Hydrophile Natur | |
| Nitrocellulosemembranen sind von Natur aus hydrophil, aber weniger hydrophil als Nylonmembranen. | Sie sind von Natur aus sehr hydrophil. |
| Immobilisierungspotential | |
| Nitrocellulosemembranen haben weniger Affinität zu Nukleinsäuren. Aber es hat eine hohe Affinität zu Proteinen. | Nylonmembranen haben ein hohes Bindungspotential mit Nukleinsäuren als Nitrocellulosemembranen. |
Zusammenfassung -Nitrocellulose gegen Nylonmembran
Nitrocellulose- und Nylonmembranen sind spezielle Blätter, die in der Blottechnik verwendet werden, um das Bändermuster auf dem Gel zu reproduzieren. Sie ermöglichen die Möglichkeit, eine bestimmte Sequenz oder ein Protein aus den Gemischen nachzuweisen, indem sie sie auf der Membran immobilisieren. Sobald die Moleküle auf der Membran immobilisiert wurden, kann sie als Substrat für die Hybridisierungsanalyse mit markierten Sonden verwendet werden. Die Nitrocellulosemembran wird häufig für den Proteinerkennung in der Western -Blot -Technik aufgrund ihrer hohen Bindungsaffinität zu Proteinen verwendet. Nylonmembranen werden häufig für das südliche und nördliche Blot verwendet. Dies ist der Unterschied zwischen Nitrocellulose und Nylonmembran.
Verweise:
1. Hayes, p. C., C. R. Wolf und j. D. Hayes. „Blottechniken für die Untersuchung von DNA, RNA und Proteinen.BMJ: British Medical Journal. U.S. Nationalbibliothek für Medizin, 14. Oktober. 1989. Netz. 07 Apr. 2017
2. Mahmood, Tahrin und Ping-Chang Yang. „Western Blot: Technik, Theorie und Fehleraufnahmen.”Nordamerikanisches Journal of Medical Sciences. Medikkennt Publikationen & Medien Pvt Ltd, September. 2012. Netz. 07 Apr. 2017
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "Western Blot Transfer" von Bensaccount bei English Wikipedia (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
