Unterschied zwischen HPLC und UPLC

Der Schlüsselunterschied zwischen HPLC und UPLC ist, dass die HPLC ermöglicht die Analyse von Partikeln mit ihrer Größe rund 5 Mikrometer, während UPLC viel kleinere Partikel mit 2 Mikrometern ermöglicht.

HPLC und UPLC sind beide flüssige chromatographische Techniken, die bei der Trennung der Komponenten einer Verbindung nützlich sind. Um den Unterschied zwischen HPLC und UPLC zu kennen, müssen wir zunächst wissen, was HPLC ist. Dies liegt daran, dass UPLC eine spezielle Version von HPLC ist und wir sie leicht verstehen können, wenn wir wissen, was HPLC ist.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist HPLC
3. Was ist UPLC
4. Seite an Seite Vergleich - HPLC vs UPLC in tabellarischer Form
5. Zusammenfassung

Was ist HPLC?

Der Begriff HPLC steht für hohe Leistung Flüssigkeits-Chromatographie. Es ist eine Technik, mit der wir verschiedene Bestandteile einer Verbindung trennen können. Außerdem ist es die am weitesten verbreitete Technik, um Komponenten einer Mischung zu identifizieren, zu quantifizieren und zu trennen. Außerdem verwendet diese Technik einen hohen Druck, um Lösungsmittel durch die Säule zu schieben. Darüber hinaus sind die Hauptanwendungen von HPLC in der Biochemie zur Analyse von Bestandteilen einer Verbindung bestehen. Dies ist eine ideale Möglichkeit zur Trennung und Identifizierung von Aminosäuren, Nukleinsäuren, Proteinen, Kohlenwasserstoffen, Pestiziden, Kohlenhydraten, Antibiotika, Steroiden und unzähligen anderen anorganischen Substanzen.

Abbildung 01: HPLC -System in einem Labor

Kurz gesagt, die Betriebsmethode der HPLC -Technik ist wie folgt. Erstens sollten wir die Probe mit einer Pumpe in den Strom der mobilen Phase in diskreten kleinen Mengen einführen. Der Pumpendruck sollte bei 40 MPa gehalten werden. Dann versiegt dieser Strom der mobilen Phasen die Spalte von HPLC durch. Auch die Komponenten in der Probe gehen durch die Spalte. Ihre Bewegungsgeschwindigkeiten unterscheiden sich jedoch voneinander. Dieser Unterschied ergibt sich aufgrund der Differenz der Wechselwirkungen zwischen den Probenkomponenten und dem Adsorbens innerhalb der Spalte. Wir nennen dies Adsorbens als stationäre Phase, da sie sich in der Spalte befindet (sich nicht bewegt). Zweitens können wir am Ende der Spalte die Probe sammeln, die aus der Spalte enthält. Dort können wir die Unterschiede in den Retentionszeiten für jede Komponente in der Probe bestimmen.

Was ist UPLC?

Der Begriff UPLC steht für Ultraherformance Flüssigchromatographie. Es ist eine Variation von HPLC, aber die Betriebsmethode ist dieselbe. Im Gegensatz zu HPLC ermöglicht diese Methode jedoch, dass sehr kleine Partikel analysiert werden, wie z. B. 2 Mikrometer kleine Partikel.

Abbildung 02: Ein UPLC -Gerät

Darüber hinaus bietet es eine schnellere Analyse. In dieser Technik verwenden wir einen Pumpendruck von 100 MPa für die Einführung der Probe in die Säule. Daher bestätigt dieser hohe Druck, dass die gesamte Probe in die Säule eingeführt wird. Dies ist daher im Vergleich zu HPLC sehr effizient.

Was ist der Unterschied zwischen HPLC und UPLC?

Der Begriff HPLC steht für Hochleistungs -Flüssigchromatographie, während der Begriff UPLC für Ultra High Performance Flüssigschromatographie steht. Daher ist die UPLC -Technik eine entwickelte Version von HPLC. Somit ist die Betriebsmethode für beide Techniken gleich. UPLC ist jedoch effizienter im Vergleich zu HPLC, da es einen hohen Pumpendruck verwendet. Der Pumpendruck für HPLC beträgt 40 MPa, während er 100 MPa für UPLC ist. Daher ist dies ein Unterschied zwischen HPLC und UPLC. Vor allem ist der Schlüsselunterschied zwischen HPLC und UPLC, dass das HPLC die Analyse von Partikeln mit einer Größe von 5 Mikrometern ermöglicht, während UPLC viel kleinere Partikel mit 2 Mikrometern ermöglicht.

Zusammenfassung -HPLC gegen UPLC

UPLC ist eine Form von HPLC. Somit sind die Betriebsmethoden gleich. Wir können jedoch einige verbesserte Funktionen in UPLC im Vergleich zu HPLC finden. Daher gibt es einen Unterschied zwischen HPLC und UPLC. Der Hauptunterschied zwischen HPLC und UPLC besteht jedoch darin, dass die HPLC die Analyse von Partikeln ermöglicht, die ihre Größe um 5 Mikrometer haben, während das UPLC viel kleinere Partikel mit 2 Mikrometern ermöglicht.

Referenz:

1. "Hochleistungsflüssigkeitschromatographie.”Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20. Oktober. 2018. Hier verfügbar
2. „UPLC.Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25. Oktober. 2017. Hier verfügbar  

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1."HPLC" von Kjaergaard in englischer Wikipedia (Public Domain) über Commons Wikimedia 
2."Bild eines UPLC -Geräts" von GREEP29 BFW - eigener Arbeit (Public Domain) über Commons Wikimedia