Unterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution

Unterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution

Der Schlüsselunterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution ist das Die isokratische Elution bezieht sich auf die Aufrechterhaltung einer konstanten Konzentration in der mobilen Phase, während die Gradientenelution auf die Aufrechterhaltung einer unterschiedlichen Konzentration in der mobilen Phase bezieht.

Die Begriffe isokratischer und Gradientenelution werden in der Chromatographie verwendet. Während eines chromatographischen Laufs verwenden wir eine stationäre Phase, die eine nicht bewegende Substanz ist, zusammen mit einer mobilen Phase, der sich bewegenden Substanz. Die isokratische und Gradientenelution beschreibt die Eigenschaften der mobilen Phase.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist isokratische Elution
3. Was ist Gradientenelution
4. Seite an Seitenvergleich - isokratische VS -Gradientenelution in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist isokratische Elution?

Isokratische Elution ist ein Begriff in der Chromatographie, wenn die mobile Phase eine konstante Konzentration aufweist. Hier ist die Konzentration der mobilen Phase während des gesamten chromatographischen Prozesses konstant. In diesem Prozess können wir die Spitzenbreite beobachten, die mit der Retentionszeit linear im Chromatogramm zunimmt. Dies führt jedoch zu einem Nachteil - die verspäteten Spitzen für die späte Elution werden sehr flach und breit. Daher werden diese breiten Peaks schwer als Spitzen zu erkennen.

Darüber hinaus ändert sich in der isokratischen Elution die Selektivität nicht gemäß den Spaltendimensionen. Dies bedeutet, dass die Selektivität nicht von den Änderungen der Spaltenabmessungen abhängt. Hier werden Länge und Durchmesser als Säulenabmessungen angesehen. Daher werden die Peaks in der gleichen Reihenfolge aufgeführt.

Was ist Gradientenelution?

Die Gradientenelution ist ein Begriff in der Chromatographie, wenn hier die mobile Phase eine unterschiedliche Konzentration hat. Mit anderen Worten muss die Konzentration der mobilen Phase nicht konstant bleiben. Beispielsweise verwendet in HPLC ein gemeinsames Trennungsverfahren anfangs Methanol 10% und endet bei 90%, indem die Konzentration allmählich erhöht wird. Die mobile Phase hat zwei Komponenten: ein schwaches Lösungsmittel und ein starkes Lösungsmittel. Schwaches Lösungsmittel ermöglicht den Stoff langsam, während starkes Lösungsmittel die schnelle Elution des gelösten Stoffes verursacht. In der Reverse -Phase -Chromatographie verwenden wir Wasser als schwaches Lösungsmittel und organisches Lösungsmittel als starkes Lösungsmittel.

Abbildung 01: HPLC

Darüber hinaus verringert die Gradientenelutionsmethode die späteren Eluting -Komponenten, um sie schneller zu erledigen, was im Chromatogramm einen schmalen Peak ergibt. Diese Methode verbessert auch die Spitzenform und die Spitzenhöhe. Darüber hinaus ändert sich bei der Gradientenelutionstechnik die Elutionsreihenfolge mit den Änderungen der Säulenabmessungen.

Was ist der Unterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution?

Die Begriffe isokratischer und Gradientenelution werden in der Chromatographie verwendet. Isokratische und Gradientenelution beschreiben die Eigenschaften der mobilen Phase. Der Hauptunterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution besteht darin, dass die isokratische Elution auf die Aufrechterhaltung einer konstanten Konzentration in der mobilen Phase bezieht, während sich die Gradientenelution auf die Aufrechterhaltung einer unterschiedlichen Konzentration in der mobilen Phase bezieht.

In der isokratischen Elutionstechnik nimmt die Spitzenbreite mit der Retentionszeit linear zu. Bei der Gradientenelutionstechnik wird die Beibehaltung der späteren Komponenten jedoch verringert, so dass die Elution schneller wird und schmale Peaks ergibt. Abgesehen davon hängt die Selektivität in der isokratischen Elution nicht von den Spaltendimensionen ab, sondern in der Gradientenelution ändert sich die Selektivität mit sich ändernden Spaltendimensionen.

Die folgende Tabelle fasst den Unterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution zusammen.

Zusammenfassung -isokratische VS -Gradientenelution

Isokratische Elution und Gradientenelution beschreiben die Eigenschaften der mobilen Phase. Der Hauptunterschied zwischen isokratischer und Gradientenelution besteht darin, dass die isokratische Elution auf die Aufrechterhaltung einer konstanten Konzentration in der mobilen Phase bezieht, während sich die Gradientenelution auf die Aufrechterhaltung einer unterschiedlichen Konzentration in der mobilen Phase bezieht.

Referenz:

1. „Gradientenelution.” Gradientenelution - Ein Überblick | Sciencedirect -Themen, Hier verfügbar.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "HPLC -Extraktion und Verwendung" von USDA - Flickr (Public Domain) über Commons Wikimedia