Unterschied zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1

Unterschied zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1

Der Schlüsselunterschied Zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1 ist das Klenow -Fragment ist ein großer Teil der DNA -Polymerase 1, der 5 bis 3 'Exonuklease -Aktivität fehlt, während die DNA -Polymerase ein Enzym ist E. coli Dies hat alle drei Domänen, einschließlich 5 bis 3 'Exonuklease -Aktivität.

DNA -Polymerase ist eines der wichtigsten Enzyme, die an DNA -Replikation in lebenden Organismen beteiligt sind. Es gibt verschiedene Formen des DNA -Polymerase -Enzyms, die in Eukaryoten und Prokaryoten auf der Größe und Form vorkommen. DNA -Polymerase 1, 2 und 3 sind nur in prokaryotischen Organismen vorhanden und spielen eine unterschiedliche Rolle bei der DNA -Replikation. DNA -Polymerase 1 hat drei Domänen mit 5 bis 3 'Polymerase, 3' bis 5 'Exonuklease -Aktivität und 5 bis 3' Exonuklease -Aktivität. Klenow -Fragment ist ein proteolytisches Produkt der DNA -Polymerase 1. Es besitzt 5 bis 3 'Polymerase und 3' bis 5 'Exonuklease -Aktivitäten der intakten DNA -Polymerase 1, aber es fehlt die 5 bis 3' Exonuklease -Aktivität.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Klenow -Fragment 
3. Was ist DNA -Polymerase 1
4. Ähnlichkeiten zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1
5. Seite für Seitenvergleich - Klenow -Fragment gegen DNA -Polymerase 1 in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Klenow -Fragment?

Das Klenow -Fragment ist ein großer Teil der DNA -Polymerase 1. Im Gegensatz zur DNA -Polymerase 1 wird in Klenow -Fragment keine Exonuklease -Aktivität nicht beobachtet. Klenow-Fragmente werden durch Verdauung von DNA-Polymerase 1 mit einer Protease genannt. In einigen Anwendungen wird die 3 'bis 5' Exonuklease -Aktivität des Klenow -Fragments unerwünscht. Es kann durch Einführung einer Mutation in das Gen entfernt werden, das das Klenow -Fragment codiert. Das resultierende Enzym, das nur die 5 bis 3 'Polymeraseaktivität hat. Morphologisch ähnelt das Klenow -Fragment der menschlichen rechten Hand. Es hat eine N-terminale 3'-5'-Exonuklease-Domäne und die C-terminale Polymerasedomäne, die um etwa 30 a getrennt ist.

Abbildung 01: Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1

Klenow -Fragment ist ein wichtiges Instrument für molekulare biologische Techniken. Klenow -Fragmente haben mehrere Verwendungen. Sie sind äußerst wichtig für das Klonieren des Stumpfes, um stumpfe Fragmente zu produzieren. Klenow -Fragmente können 3 'Überhänge entfernen oder 5' Überhänge füllen, um stumpfe Enden zu bilden. Darüber hinaus werden Klenow-Fragmente verwendet, um doppelsträngige DNA aus einzelnen Strängen zu synthetisieren. Darüber hinaus werden sie verwendet, um radioaktiv markierte Sonden unter Verwendung der 5'TO 3 'DNA -abhängigen DNA -Polymeraseaktivität vorzubereiten.

Was ist DNA -Polymerase 1?

DNA -Polymerase 1 (Pol 1) ist ein Enzym, das in Prokaryoten gefunden wird, das für die bakterielle DNA -Replikation benötigt wird. Es ist die erste Art von DNA -Polymerase, die 1956 von Arthur Kornberg entdeckt wurde. Pol 1 ist die am häufigsten vorkommende Polymerase in E. coli. Es wird vom Gen kodiert Pola und bestehend aus 928 Aminosäuren. Es besteht aus drei Domänen. Alle drei Domänen erfüllen unterschiedliche Funktionen. Zwei Domänen führen 5 'bis 3' Exonuklease -Aktivität und 3 'bis 5' Exonuklease -Aktivität aus. Aufgrund dieser Aktivität, die von Pol 1 besessen ist, ist es als DNA -Reparaturenzym und eher als DNA -Replikationsenzym beliebt. Die dritte Domäne kann vor der Freigabe der Template -DNA mehrere Polymerisierungen (5 bis 3 ') katalysieren und Okazaki -Fragmente miteinander verbinden, indem neue DNA gefüllt und RNA -Primer entfernt werden.

Abbildung 02: DNA -Polymerase

Pol 1 isoliert von E coli wurde in molekularen Anwendungen ausführlich eingesetzt. Sobald die TAQ -Polymerase entdeckt wurde, ersetzte sie die E coli Pol 1 in der PCR -Technologie. Taq -Polymerase ist eine Art thermostabiler DNA -Polymerase, die zu Pol 1 gehört.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1?

  • Das Klenow -Fragment ist ein großer Teil der DNA -Polymerase 1.
  • Sie haben eine 5'TO 3 'DNA -abhängige DNA -Polymeraseaktivität und eine Exonuklease -Aktivität von 3'to 5', die das Korrekturlesen vermitteln.
  • Sie werden für mehrere Zwecke verwendet.

Was ist der Unterschied zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1?

Der Schlüsselunterschied zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1 besteht darin. Daher hat Klenow -Fragment zwei Domänen, während die DNA -Polymerase 1 alle drei Domänen hat.

Die folgende Infografik zeigt mehr Details zum Unterschied zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1.

Zusammenfassung -Klenow -Fragment gegen DNA -Polymerase 1

DNA -Polymerase 1 ist ein Enzym von E. coli Dies hat drei Domänen als 5 'bis 3' Polymerisationsdomäne, 3 'bis 5' Exonuklease -Domäne und 5 bis 3 'Exonuklease -Domäne. Klenow -Fragment ist ein großer Teil der DNA -Polymerase. Es fehlt eine Domäne der DNA -Polymerase 1, die die 5 bis 3 'Exonuklease -Domäne ist. Der Schlüsselunterschied zwischen Klenow -Fragment und DNA -Polymerase 1 besteht darin.

Referenz:

1. „DNA -Polymerase I - Ein Überblick | Sciencedirect -Themen “. Sciencedirect.Com, 2020, hier erhältlich.
2. "Klenow -Fragment". En.Wikipedia.Org, 2020, hier erhältlich.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Polymerasedomains" von (unbekannt) "Molekül des Monats", März 2000 - Proteindatenbank (gemeinfrei) über Commons Wikimedia
2. "DNA -Polymerase" von Yikrazuul - Eigenes Werk (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia