Unterschied zwischen Reversephase und Normalphasen -HPLC

Der Schlüsselunterschied Zwischen der Rückwärtsphase und der Normalphasen -HPLC befindet sich die Die Reverse -Phase -HPLC verwendet eine unpolare stationäre Phase und eine polare mobile Phase, während die Normalphasen -HPLC eine polare stationäre Phase und eine weniger polare mobile Phase verwendet.

Die normale Phasen -HPLC ist die älteste Technik von HPLC, die TSWETT in seinen Trennungen von Pflanzenextrakten verwendet hat. Er benutzte Kreide in einer Glassäule. Dies war die klassische Chromatographie -Art, die dazu führte, dass sie als „normale“ Technik benannte. Umgekehrter Phasen HPLC hingegen ist das Gegenteil der normalen Technik, die Wissenschaftler in letzter Zeit entwickelt haben.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist die Reverse -Phase -HPLC
3. Was ist normale Phasen HPLC
4. Seite für Seitenvergleich - Rückwärtsphase gegenüber normaler PhasenhPLC in tabellarischer Form
5. Zusammenfassung

Was ist die Reverse -Phase -HPLC?

Reverse Phase HPLC ist eine chromatographische Technik, bei der wir eine hydrophobe stationäre Phase verwenden. Unter allen HPLC -Methoden verwenden wir diese Methode für ungefähr 70% aufgrund ihrer breiten Anwendbarkeit und Reproduzierbarkeit. Die stationäre Phase ist unpolar und die mobile Phase ist polar.

In den meisten Fällen verwenden Wissenschaftler eine wässrige Wassermischung mit einem mischbaren, polaren organischen Lösungsmittel wie Acetonitril oder Methanol als mobile Phase. Daher interagieren die Analyten mit der unpolaren stationären Phase.

Was ist normale Phasen HPLC?

Normal Phase HPLC ist eine chromatographische Technik, bei der wir eine hydrophile stationäre Phase verwenden. Es ist die traditionelle Methode von HPLC, obwohl wir sie nicht so sehr verwenden. Die stationäre Phase ist polar und die mobile Phase ist unpolar. Noch wichtiger ist, dass die mobile Phase dieser Technik 100% organisch ist. Es bedeutet, dass dafür kein Wasser verwendet wird.

Abbildung 01: Ein Probenprofil für die HPLC -Chromatogramme der normalen Phase und für die Reverse -Phase -Chromatogramme gemäß der Polarität von Komponenten im Analyten.

Typischerweise enthält die stationäre Phase Kieselsäure, Cyano, Diol, Amino -gebundene Phasen usw. Mobile Phasen umfassen organische Lösungsmittel wie Hexan, Ethylacetat usw. Diese Technik basiert auf der Beibehaltung von Lösungsmittel- oder Analytmolekülen auf die polare stationäre Phase.

Was ist der Unterschied zwischen der Rückwärtsphase und der normalen Phase HPLC?

Reverse Phase HPLC ist eine chromatographische Technik, bei der wir eine hydrophobe stationäre Phase verwenden. Die stationäre Phase dieser Technik ist unpolar, während die mobile Phase polar ist. Darüber hinaus verwenden Wissenschaftler eine wässrige Wassermischung mit einem mischbaren, polaren organischen Lösungsmittel wie Acetonitril oder Methanol als mobile Phase in der HPLC in der Reverse Phase. Im Gegensatz dazu ist die normale Phasen -HPLC eine chromatographische Technik, bei der wir eine hydrophile stationäre Phase verwenden. Die stationäre Phase dieser Technik ist polar, während die mobile Phase unpolar ist. Darüber hinaus verwenden Wissenschaftler organische Lösungsmittel wie Hexan, Ethylacetat usw. als mobile Phase der normalen Phasen -HPLC. Die folgende Infografik zeigt den Unterschied zwischen der Rückwärtsphase und der Normalphasen -HPLC in tabellarischer Form.

Zusammenfassung -Reverse Phase vs Normal Phase HPLC

HPLC -Techniken der Rückwärtsphase und normalen Phasen sind zwei flüssige chromatographische Techniken. Die Schlüsselunterschiede zwischen der Rückwärtsphase und der Normalphasen -HPLC besteht darin, dass die Reverse -Phase -HPLC eine unpolare stationäre Phase und eine polare mobil.

Referenz:

1. Wasser. „HPLC -Trennmodi.”HPLC - Hochleistungsflüssige Chromatographie erklärt: Wasser. Hier verfügbar