Unterschied zwischen wählbarem Marker und Reportergen

Schlüsselunterschied - Selektierbarer Marker gegen Reportergen
 

Genetische Technik wird verwendet, um wichtige Gene vom Organismus auf einen anderen Organismus zu übertragen. Die Einführung eines fremden Gens in das Genom eines anderen Organismus und das Expression in der Wirtszelle sind die schwierigsten Schritte beim Übertragen von Genen. Um den Erfolg des Transformationsprozesses zu erkennen, werden im rekombinanten Molekül ein wählbarer Marker und ein Reportergen verwendet. Ein wählbarer Marker ist eine DNA-Sequenz oder ein Gen, das die transformierten Zellen aus den nicht transformierten Zellen ausdrückt und auswählt. Ein Reportergen ist ein weiteres Gen, das verwendet wird, um transformierte Zellen zu unterscheiden und zu quantifizieren oder nachzuweisen, wie das eingefügte Gen im Wirt funktioniert. Der Schlüsselunterschied zwischen wählbarem Marker und Reportergen ist, dass die Selektierbarer Marker wird verwendet, um die nicht transformierten Zellen herauszufinden und die transformierten Zellen zu signalisieren, während das Reportergen verwendet wird.

INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist ausgewählbarer Marker
3. Was ist Reportergen
4. Seite für Seitenvergleich - Selektierbarer Marker gegen Reportergen
5. Zusammenfassung

Was ist ein wählbarer Marker?

In der Gentechnik wird das interessierende Gen in einen geeigneten Vektor eingefügt und in Wirtsorganismen verwandelt. Die Transformation ist jedoch nur in den kompetenten Wirtszellen erfolgreich, und es besteht die Möglichkeit, dass Wirtszellen die Aufnahme von Fremdkörpern ablehnen. Daher ist die Differenzierung der transformierten und nicht transformierten Zellen wichtig, um mit weiteren Experimenten fortzufahren. Daher integrieren Forscher ein wählbares Marker-Gen in den Vektor, um die transformierten Zellen aus nicht transformierten Zellen einfach auszuwählen. Ein wählbarer Marker ist eine DNA -Sequenz, insbesondere ein Gen, das zur Identifizierung der transformierten Zellen nützlich ist. Dieses Marker-Gen weist ein Merkmal auf.

Die am häufigsten in der molekularen Biologie verwendeten selektierbaren Marker sind antibiotikaresistente Gene. Ein Antibiotikaresistenzgen ist in den Vektor eingeführt und in Wirtszellen insbesondere in das Wirtsbakterium umgewandelt. Dieses bestimmte Antibiotikum wird in das wachsende Medium des Bakteriums eingebaut.  Aufgrund des Vorhandenseins des selektiven Markers können unter den selektiven Bedingungen nur Zellen, die den entsprechenden selektierbaren Marker enthalten. Nicht transformierte Zellen können im Antibiotika-haltigen Medium nicht wachsen. Daher können aufgrund des wählbaren Markers, der antibiotikaresistent ist, transformierte Zellen leicht zu identifizieren.

Gene, die Merkmale für Antimetaboliten verleihen, werden Herbizide als selektive Marker bei Klonierungsvektoren in der Pflanzengenetischen Technik verwendet. Diese Cotransformation selektiver Marker in gentechnisch veränderte Organismen hat jedoch negative Auswirkungen auf die Umwelt und den Menschen. Die Freisetzung von antibiotika resistenten Bakterien kann den Antibiotikarewiderstand menschlicher Krankheitserreger erhöhen. Es kann das Produkt oder die Biomasse durch Antibiotika kontaminieren und den selektiven Druck aufgrund von Antibiotika -Abbau und Inaktivierung verlieren.

Abbildung 01: Plasmidvektor für den Gentransfer mit wählbarem Marker

Was ist ein Reportergen?

Reportergene sind Gene, die den Nachweis oder die Messung der eingefügten Genexpression ermöglichen. Diese Reportergene können an regulatorische Sequenzen des interessierten Gens angeschlossen werden, um den Expressionsort oder die Ebenen zu signalisieren. Daher werden sie während der Expression von Genen unter demselben Promotor in eine einzelne mRNA.

Reportergene sind von verschiedenen Typen und enthalten visuell identifizierbare Eigenschaften, die normalerweise an Fluoreszenz- und Lumineszenzproteinen beteiligt sind. Gene, die fluoreszierendes Protein und Enzyme codieren, unsichtbare Substrate in lumineszierende oder farbige Produkte konvertieren, indem sie die erfolgreiche Genexpression signalisieren und die Möglichkeit zur Quantifizierung der Genexpression geben.

Abbildung 02: Reportergenexpression

Was ist der Unterschied zwischen wählbarem Marker und Reportergen?

Zusammenfassung -Selektierbarer Marker gegen Reportergen

Ausgewählte Marker ermöglichen es transformierte Zellen, in selektiven Medien zu wachsen, die mit bestimmten Antibiotika oder Herbiziden dosiert sind. Sie werden für die frühe Auswahl transformierter Zellen verwendet. Reportergene werden verwendet, um das Expressionsniveau des gewünschten Gens eingeleitet zu quantifizieren. Sie ermöglichen auch die Differenzierung transformierter und nicht transformierter Zellen. Dies ist der Unterschied zwischen wählbarem Marker und Reportergen. Sowohl wählbare Marker als auch Reportergen werden als wichtige Marker in der Gentechnik angesehen.

Verweise:
1. Ziemienowicz, Alicja. „Pflanzenauswahlbare Marker und Reportergene.”Springerlink. Springer-Verlag, n.D. Netz. 23. März. 2017.
2. Shih, Chen-Han, Hsiao-yin Chen, Hung-Chieh Lee und Huai-Jen Tsai. „Lila Chromoprotein -Gen dient als neuer Selektionsmarker für die Transgenese der Mikroalga nannochloropsis oculata." PLUS EINS. Öffentliche Bibliothek der Wissenschaft, n.D. Netz. 25. März. 2017

Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "Plasmid with Insert" von Michael Jeltsch - eigene Arbeit (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia
2. "Reporter Gene" von transcontrol bei en en.Wikipedia (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia