Unterschied zwischen Saccharosegradienten und Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation

Der Schlüsselunterschied zwischen Saccharosegradienten und Saccharosekissen -Ultrazentrifugation ist das Bei Saccharosegradienten -Ultrazentrifugation wird ein kontinuierlicher Saccharosegradienten verwendet, während bei Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation ein diskontinuierlicher Saccharose -Gradient verwendet wird.

Saccharose -Gradienten und Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation sind zwei ähnliche Arten von Techniken, die zur Trennung spezifischer Arten von Makromolekülen verwendet werden. In beiden Techniken wird ein Saccharosedichtegradient verwendet. Bei Saccharose -Gradienten -Ultrazentrifugation wird jedoch ein fortlaufender Dichtegradient verwendet, während bei Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation ein diskontinuierlicher Dichtegradient verwendet wird.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Saccharose -Gradienten -Ultrazentrifugation
3. Was ist Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation
4. Ähnlichkeiten zwischen Saccharosegradienten und Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation
5. Seite an Seitenvergleich - Saccharose -Gradient gegen Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung

Was ist Saccharose -Gradienten -Ultrazentrifugation?

Saccharosegradienten -Ultrazentrifugation ist eine Technik, mit der Makromoleküle wie DNA, RNA und Proteine ​​fraktioniert werden können. Diese Technik gibt es mehrere Schritte. Sie sind Saccharose -Gradientenvorbereitung, Zentrifugation, Trennung und Elution. Die Gradientenvorbereitung ist der Hauptschritt in dieser Technik. In dieser Technik ist die Probe, die Makromoleküle mit unterschiedlicher Größe enthält. Beim zentrifugierenden Makromoleküle unterschiedlich großer Sediment durch die Saccharose -Gradientensäule mit unterschiedlichen Raten. Die Sedimentation hängt von mehreren Faktoren ab, einschließlich der Zentrifugationskraft, der Größenform und der Dichte von Makromolekülen, Dichte und Viskosität des Gradienten. Am Ende der Zentrifugation werden Makromoleküle durch Dichte räumlich getrennt. Größere Makromoleküle (Makromoleküle mit hoher Dichte) nach unten. Leichtere (Makromoleküle mit niedriger Dichte) bleiben ganz oben am Gradienten. Daher trennen sich die Moleküle als unterschiedliche Bänder. Dann sollten die Bänder getrennt werden, und die Reinigung des spezifischen Makromoleküls von Saccharose muss erledigt werden.

Abbildung 01: Saccharose -Gradienten -Ultrazentrifugation

Auf der Anwendungsseite wird diese Methode ausgiebig zur Fraktionierung von DNA -Molekülen verwendet. Saccharosegradienten -Ultrazentrifugation wird üblicherweise verwendet, um die Größe und Zusammensetzung der Proteinkomplex zu charakterisieren. Darüber hinaus wird diese Technik für die teilweise Reinigung von mRNA verwendet.

Was ist Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation?

Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation ist eine weitere Technik, die die Fraktionierung von Makromolekülen ermöglicht. Im Gegensatz zur Ultrazentrifugation von Saccharosedichte -Gradienten verwendet Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation einen diskontinuierlichen Dichtegradienten. Die Saccharosekonzentration nimmt in diskreten Schritten von oben nach unten zu. In dieser Technik wird die Trennung erreicht, indem der geklärte Extrakt auf ein kleines Volumen einer Saccharose-Lösung in einem Zentrifugenröhrchen, dem sogenannten Saccharosekissen, gelegt wird. Dies ermöglicht eine bessere Trennung in der Hochgeschwindigkeitszentrifugation. Wenn sich die Moleküle als Band zwischen dem Saccharosekissen trennen, kann das weiße Band gesammelt und gereinigt werden. Darüber hinaus können Verunreinigungen unter Verwendung der Saccharose -Kissen -Methode weiter entfernt werden. Saccharose-Kissenmethode ermöglicht es, 60-70% des Röhrchens mit der Probe zu füllen. Daher ermöglicht die Saccharose -Kissen -Methode ein größeres Volumen der Probeverarbeitung.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Saccharosegradienten und Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation?

• Saccharose -Gradient und Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation sind zwei Techniken, mit denen eine Mischung aus Makromolekülen getrennt wird.
• Bei beiden Methoden wird ein Saccharose -Gradient verwendet.
• Die Zentrifugation ist ein Schritt in beiden Methoden.
• Das Sediment der Moleküle als Bande oder Zone in jeder Methode.

Was ist der Unterschied zwischen Saccharosegradienten und Saccharosekissen -Ultrazentrifugation?

Ultrazentrifugation von Saccharosegradienten ist eine Technik, die einen kontinuierlichen Saccharose -Gradienten im Zentrifugenröhrchen verwendet, während Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation eine Technik ist, die einen diskontinuierlichen Saccharose -Gradienten verwendet. Dies ist daher der Schlüsselunterschied zwischen Saccharosegradienten und Saccharosekissen -Ultrazentrifugation.

Darüber hinaus ermöglicht die Ultrazentrifugation des Saccharose -Kissens, dass ein größeres Volumen der Probe verarbeitet werden kann.

Nachfolgend Infografik tabuliert mehr Unterschiede zwischen Saccharosegradienten und Saccharosekissen -Ultrazentrifugation.

Zusammenfassung -Saccharose -Gradient gegen Saccharose -Kissen -Ultrazentrifugation

Saccharose -Gradienten -Ultrazentrifugation trennt Makromoleküle mit einem kontinuierlichen Saccharose -Gradienten. Im Gegensatz dazu verwendet die Ultrazentrifugation von Saccharose -Kissen einen diskontinuierlichen Saccharose -Gradienten, um die spezifische Partikelart in einer Mischung zu trennen. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Saccharosegradienten und Saccharosekissen -Ultrazentrifugation. Die Saccharose -Kissen -Methode ermöglicht die Sammlung von morphologisch intakten Partikeln. Darüber hinaus ermöglicht die Ultrazentrifugation des Saccharose -Kissens ein größeres Volumen der Probe als die Ultrazentrifugation des Saccharosegradienten.

Referenz:

1. Dijkstra, Jeanne und Cees P. de Jager. „Dichte-Gradient-Zentrifugation.Springerlink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. Januar. 1998, hier erhältlich.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

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