Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector
Schlüsselunterschied - YAC vs M13 Phage -Vektor
Die DNA -Klonierung ist ein wichtiger Prozess, der die Ausbreitung wichtiger DNA -Fragmente von Organismen ermöglicht. Es erfordert das Verbinden einer spezifischen DNA mit Vektor -DNA, um rekombinante DNA zu erzeugen, die sich in den Wirtsorganismus verwandelt. Ein Vektor ist ein DNA. Es sollte in der Lage sein, sich im Wirtsorganismus zu replizieren und mehrere Kopien von rekombinanter DNA zu erzeugen. Es gibt verschiedene Arten von Vektoren, die im DNA -Klonen verwendet werden. Hefekunstchromosom (YAC) und M13 -Phagenvektor sind zwei Arten unter ihnen. Der wichtigste Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector ist das YAC ist ein künstliches Chromosom, das in Hefezellen repliziert während M13 -Phagenvektor ist eine einzeln gestrandete kreisförmige DNA von Bacteriophage M13, die in repliziert E coli Zellen.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist yac
3. Was ist M13 Phage Vector
4. Seite an Seitenvergleich - YAC vs M13 Phagesvektor
5. Zusammenfassung
Was ist ein YAC -Vektor?
YAC ist ein künstlich gebautes Chromosom, das die Fähigkeit hat, ein großes Segment aus fremdem DNA zu tragen und innerhalb der Hefezellen zu replizieren. Es hat Centromere, Telomere und autonom replizierende Sequenzen, die für die Replikation und Stabilität wesentlich sind. YAC sollte auch einen selektiven Marker oder Markier- und Restriktionsstellen tragen, um ihn zu einem wirksamen Klonvektor zu machen. Große Sequenzen im Bereich von 1000 kb bis 2000 kb können in YAC eingefügt und in Hefe übertragen werden.
Abbildung 01: YAC -Vektor
Was ist M13 Phage Vector?
Bacteriophage M13 ist ein Virus, das sich infiziert und wiederholt E coli. Das Genom des M13 -Bakteriophagen ist klein, ungefähr 6.7 kb. Es handelt. Dieser Virus infiziert speziell E coli Bakterien durch F Pilus. Sobald es in das SSDNA in das Bakterium eintritt. RF kann sich wie ein Plasmid innerhalb des Wirtsorganismus verhalten. Die dsDNA reproduziert innerhalb E coli und produziert ssDNA mit neuen Phagen. Diese neuen Phagen werden kontinuierlich aus dem entlassen E coli ohne die Wirtszelle zu töten. Die Infektion verlangsamt jedoch das Wachstum von E coli. DSDNA kann aus Bakterienzellen extrahiert und als Vektoren in der DNA -Klonierung verwendet werden. Sie sind als M13 -Phagenvektoren bekannt. Sie können leicht manipuliert und ähnlich wie Plasmidvektoren verwendet werden.
Die inhärente Fähigkeit zur Infektion dieser M13 -Phagen dient als gute Qualifikation, die als Vektor in der Genklonierung verwendet werden kann. Bei der Entwicklung von M13 in einen Vektor sollten mehrere Elemente in sein Genom integriert werden. Sie sind ein Gen für das Lac Repressor (LAC I) -Protein, die operatorproximale Region der lac z Gen, ein LAC -Promotor und eine Mehrfachklonierungsstelle (Polylinker). Wenn dsDNA des M13 als Vektoren verwendet wird, kann es als Plasmidvektor behandelt werden. Die Verwendung von SSDNA M13 hat jedoch Vorteile bei der DNA-Sequenzierung und der ortsgerichteten Mutagenese.
Da M13 Phage Vector mehrere Klonen aufweist in lacz Region, rekombinierte Vektoren können leicht durch das blaue/weiße Kolonie-Screening auf Agarplatten mit IPTG und X-Gal identifiziert werden. Auf den Platten hergestellte blaue Plaques enthalten nicht die rekombinierten Phagen. Daher können Phagen mit Einsätzen für den Klonierungszweck ausgewählt werden.
Abbildung 02: Bakteriophage M13
Was ist der Unterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector?
YAC vs M13 Phage -Vektor | |
| YAC ist ein gentechnisch verändertes Chromosom, das die Fähigkeit hat, ein großes Segment aus fremdem DNA zu tragen und innerhalb der Hefezellen zu replizieren. | M13 -Phagenvektor ist ein von Bacteriophage M13 entwickelter viraler Vektor, der zum Einsetzen fremder DNA verwendet wird E coli. |
| Zweck | |
| YACs wurden ausgelegt, um große Fragmente der genomischen DNA in Hefe zu klonen. | M13 -Phagenvektoren werden verwendet, um fremde DNA in die Einführung von DNA in E coli. |
| Länge einlegen | |
| YACs können genomische Megabase -Größe enthalten (1000 kb - 2000 kb). | Die Größe der Einsätze beträgt ca. 1.500 BPS. |
| Konstruktion | |
| YAC -DNA ist schwer intakt zu reinigen und erfordert eine hohe Konzentration zur Erzeugung von YAC -Vektorsystemen. | Es tritt über eine zyklische Photosynthese -Elektronenkette auf. |
| Stabilität | |
| Yac ist instabil. | M13 -Phagen können leicht extrahiert werden. |
| Größe | |
| Enzyme sind größere Moleküle. | M13 -Phagen sind stabil als yac. |
Zusammenfassung - YAC vs M13 Phage -Vektor
YAC ist ein künstlich konstruiertes Vektorsystem, das eine bestimmte Region von Hefechromosom unter Verwendung großer Segmente von genetischem Material in Hefezellen einfügt. M13 -Phagenvektor ist ein Vektorsystem, das aus Bakteriophagen M 13 abgeleitet ist, das verwendet E coli Als Gastorganismus. Dies ist der Hauptunterschied zwischen YAC und M13 Phage Vector. Beide sind gleichermaßen nützlich bei rekombinanter DNA -Technologie und Genklonierung.
Referenz:
1."Vektor.”Genetics -Notes - Vektor. N.P., N.D. Netz. 16. Mai 2017. https: // Genetics-notes.Wikispaces.com/vektor
2.Künstliche Chromosom Hefe.”Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21. April. 2017. Netz. 16. Mai 2017. .
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "M13B" von J3D3 - eigene Arbeit (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia
