Was ist der Unterschied zwischen Elisa und Elispot

Der Schlüsselunterschied Zwischen Elisa und Elispot ist das ELISA ist ein enzymgebundener Immunosorbent-Assay, der die Gesamtkonzentration von sekretierten Signalproteinen bestimmt, während Elispot ein enzymgebundener immunosorbierender Assay ist, der einzelne zytokinsekretierende Zellen nachweist.

ELISA und ELISPOT sind zwei enzymgebundene immunosorbentische Assays, die in der Medizin, Pflanzenpathologie, Biotechnologie und verschiedenen Pharmaindustrien weit verbreitet sind. In diesen Techniken wird ein Proteinanalyten von einem dagegen gerichteten Antikörper nachgewiesen. ELISA ist der beliebteste enzymgebundene immunosorbentische Assay, der in Laboratorien verwendet wird. Auf der anderen Seite ist Elispot ein von Enzym gebundener Immunosorbent-Assay, der nicht anstelle von ELISA verwendet, sondern zusätzlich zu ELISA in Labors verwendet wird.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Elisa
3. Was ist Elispot
4. Ähnlichkeiten - Elisa und Elispot
5. Elisa gegen Elispot in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung - Elisa gegen Elispot

Was ist Elisa Assay?

ELISA ist ein enzymgebundener Immunosorbent-Assay, der die Gesamtkonzentration sekretierter Signalproteine ​​bestimmt. Es ist ein weit verbreiteter analytischer Biochemie -Assay, der 1971 erstmals von Engvall und Perlmann beschrieben wurde. Diese Technik verwendet einen Festphasentyp von Enzym-Immunoassay, um das Vorhandensein eines spezifischen Proteins in einer flüssigen Probe unter Verwendung von Antikörpern, die gegen dieses spezifische Protein gerichtet sind. Dieser Assay ist ein häufig verwendetes diagnostisches Instrument in Medizin, Pflanzenpathologie und Biotechnologie.

Mechanismus des ELISA -Tests

In den meisten Fällen des ELISA -Test. Dann wird der passende primäre Antikörper über die feste Stützoberfläche angewendet. Dieser Antikörper bildet einen Komplex mit dem Antigen (Antigen-Antikörperkomplex). Der primäre Antigen -gebundene primäre Antikörper kann durch einen sekundären Antikörper nachgewiesen werden, der durch Biokonjugation mit einem Enzym verbunden ist. Im letzten Schritt des ELISA -Tests wird eine Substanz hinzugefügt, die das Substrat des Enzyms enthält. Wenn ein primärer Antikörper an das Antigen eine ordnungsgemäße Bindung vorliegt, wird eine nachweisbare Farbänderung durch das Substrat erzeugt. Letztendlich quantifiziert dies das Antigen in der Probe.

Abbildung 01: verschiedene Arten von ELISA

Darüber hinaus gibt es verschiedene Ansätze für ELISA, wie Direct Elisa und indirekte Elisa. Gegenwärtig werden verschiedene ELISA -Tests verwendet, um menschliche Krankheitserreger wie zu erkennen Mycobacterium tuberculosis, Rotavirus, Hepatitis B -Virus, Hepatitis -C -Virus, Enterotoxin produzieren E.coli, HIV und SARS-COV-2.

Was ist Elispot -Assay?

Elispot ist ein enzymgebundener Immunosorbent-Assay, der einzelne zytokinsekretierende Zellen nachweist. Cecil Czerkinsky beschrieb Elispot 1983 erstmals. Es ist eine Art von Assay, der sich auf die quantitative Messung der Häufigkeit der Zytokinsekretion für eine einzelne Zelle konzentriert. Es wird auch als Technik eingestuft, die Antikörper verwendet, um einen biologischen oder chemischen Proteinanalyten nachzuweisen. Der Fluorospot -Assay ist eine Variation des ELISPOT -Assays, bei dem Fluoreszenz verwendet wird, um mehrere Analyten (geheimnisvollere Proteine) zu analysieren.

Mechanismus des Elispot -Tests

In diesem Mechanismus werden zunächst zytokinspezifische monoklonale Antikörper in die Brunnen der Mikrofitierplatten hinzugefügt. Dann werden die gewünschten Zellen in die Brunnen zugesetzt. Später werden die Zellen inkubiert. Während der Zellinkubation dürfen die Zellen auf alle Reize reagieren und Zytokin sezernieren. Die Zytokine, die von den inkubierten Zellen sekretiert wurden.

Abbildung 02: Elispot -Assay

Um diese zytokinspezifischen monoklonalen Antikörper nachzuweisen. Biotinylierte spezifische Nachweisantikörper erfassen die zytokinspezifischen monoklonalen Antikörper in den Brunnen. Darüber hinaus werden Streptavidin-Enzym-Konjugate zu den Brunnen zugesetzt, um sich mit den Nachweisantikörpern zu binden. Im letzten Schritt werden die Brunnen bestimmte Substrate hinzugefügt. Die Reaktionen von Enzymkonjugaten und Substraten erzeugen unterschiedliche Flecken in den Brunnen. Diese unterschiedlichen Stellen werden auf einem automatisierten Elispot -Leser gelesen. Letztendlich wird dies die Häufigkeit der Zytokinsekretion weiter berechnen.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Elisa und Elispot??

• Sie sind beide enzymgebundene immunosorbente Tests.
• Beide Tests erkennen spezifische Proteinanalyten nach.
• Diese Assays verwenden spezifische Antikörper, um die Proteinanalyten zu identifizieren.
• Beide Assays verwenden Enzyme und Substrate.
• Sie werden als diagnostisches Instrument in medizinischen Labors verwendet.

Was ist der Unterschied zwischen Elisa und Elispot?

ELISA ist ein enzymgebundener Immunosorbent-Assay, der die Gesamtkonzentration sekretierter Signalproteine ​​bestimmt. Auf der anderen Seite ist Elispot ein enzymgebundener immunosorbentierter Assay, der einzelne Zytokin-Sekreting-Zellen misst. Dies ist also der Hauptunterschied zwischen Elisa und Elispot. Darüber hinaus ist das Antigen im ELISA -Test zunächst in die Mikrofitre Brunnen immobilisiert. Im Gegensatz dazu wird der Antikörper im Elispot -Test zunächst auf die Mikrofitrevertiefungen immobilisiert. Dies ist also ein weiterer Unterschied zwischen Elisa und Elispot.

Die folgende Infografik zeigt eine detaillierte Analyse des Unterschieds zwischen ELISA und Elispot in tabellarischer Form.

Zusammenfassung -Elisa gegen Elispot

ELISA und ELISPOT sind zwei enzymgebundene immunosorbentische Assays, die in der Medizin, Pflanzenpathologie, Biotechnologie und verschiedenen Pharmaindustrien häufig verwendet werden. ELISA erkennt das Vorhandensein eines Liganden (Protein. Der Elispot -Assay ist eine weit verbreitete Methode zur Überwachung der Immunantworten. Es erkennt individuelle Zytokin -Sekreting -Zellen unter Verwendung von Antikörpern. Es ist sowohl eine Immunoassay- als auch eine Bioassay -Technik. Dies ist also die Zusammenfassung des Unterschieds zwischen Elisa und Elispot.

Referenz:

1. Horlock, Claire. „Enzymgebundener Immunosorbent-Assay (ELISA).Britische Gesellschaft für Immunologie.
2. „Elispot.”Sciencedirect -Themen.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Elisa Typen" von Allan.Richard5093 - eigene Arbeit (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia
2. "Elispot -en" von Dadofbeanandbug - Diese Datei wurde abgeleitet von: Elispot.PNG (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia