Was ist der Unterschied zwischen FPLC und HPLC
Der Schlüsselunterschied FPLC und HPLC ist, dass FPLC eine Art Flüssigchromatographie ist, die große Biomoleküle wie Proteine, Nukleotide und Peptide reinigt.
Die Flüssigschromatographie ist eine Technik, mit der eine Probe in ihre einzelnen Komponenten getrennt wird. Diese Trennung tritt aufgrund der Wechselwirkung spezifischer Proben mit mobilen und stationären Phasen auf. Komponenten innerhalb einer Probe werden basierend auf der Affinität der einzelnen Komponenten zur mobilen Phase in der Flüssigchromatographie getrennt. Wenn die mobile Phase und die Probe durch eine Säule gelangen. Daher sind FPLC und HPLC zwei Arten von Flüssigchromatographie -Techniken.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist FPLC
3. Was ist HPLC
4. Ähnlichkeiten - FPLC und HPLC
5. FPLC gegenüber HPLC in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung - FPLC vs HPLC
Was ist FPLC?
FPLC ist eine Art Flüssigchromatographie, die große Biomoleküle wie Proteine, Nukleotide und Peptide reinigt. Der Schnelle Proteinflüssigkeitschromatographie (FPLC) wurde erstmals 1982 in Schweden von Pharmacia Company entwickelt und vermarktet. Es wird häufig verwendet, um Proteinmischungen zu analysieren oder zu reinigen. Dies erfolgt auf der Grundlage des Prinzips der Affinitäten der Probenkomponenten für die Bewegungsflüssigkeit (mobile Phase) und eines porösen festen Materials (stationäre Phase). In FPLC ist die mobile Phase ein Puffer, und die stationäre Phase besteht aus Perlen, das aus Perlen besteht. Es besteht normalerweise aus vernetzten Agarose, die in eine zylindrische Glas- oder Kunststoffsäule gepackt sind.
Abbildung 01: FLPC (Schnellprotein -Flüssigchromatographie) Apparat
In den meisten FLPC -Strategien wird Ionenaustauschharz verwendet. Daher wird das interessierende Protein durch eine Ladungswechselwirkung an das Harz binden. Die FLPC -Technik verwendet auch zwei Puffer: Puffer 1 (der Laufpuffer) und Puffer 2 (der Elutionspuffer). Anfänglich wird das von der Säule laufende Puffer- und Probenmischung das interessierende Protein an der Mischung durch eine Ladungsinteraktion an das Harz binden. Das interessierende Protein wird jedoch dissoziiert und kehrt zur Lösung im Elutionspuffer zurück, wenn der Elutionspuffer am Ende des Prozesses durch die Säule verläuft. Später geht die Lösung (Eluant, die das interessierende Protein enthält) durch zwei Detektoren, die die Salzkonzentration und die Proteinkonzentration messen. Während jedes Protein eluiert ist, erscheint es während des Nachweiss als „Peak“ und kann zur weiteren Verwendung gesammelt werden.
Was ist HPLC?
HPLC ist eine Art Flüssigchromatographie, die Verbindungen mit kleinem Molekulargewicht trennt. 1969 wurde das erste HPLC von der Waters Corporation, USA, kommerziell hergestellt. In Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC) wird ein Probengemisch (Analyten) in einem Lösungsmittel (mobile Phase) durch eine Säule mit chromatographischer Verpackungsmaterial (stationäre Phase) bei Hochdruck gepumpt. Das Probengemisch wird von einem sich bewegenden Trägergasstrom aus Helium oder Stickstoff getragen.
Abbildung 02: HPLC (Hochleistungs-Flüssigchromatographie)
Die Komponenten in der Probenmischung, die die geringste Wechselwirkung mit der stationären Phase haben oder die größte Interaktion mit der mobilen Phase. Andererseits verlässt die Komponenten im Probenmisch. Basierend auf dem obigen Interaktionsprinzip können die Komponenten des Probengemisches getrennt werden. Darüber hinaus identifiziert der Instrumentendetektor jede Komponente des Probengemischs, das die Säule verlässt. HPLC wird verwendet, um Umwelt- und biologische Proben auf das Vorhandensein oder Fehlen bekannter Verbindungen wie Arzneimittel, Toxine oder Pestizide zu inspizieren. Es wird in verschiedenen Branchen wie Pharmazeutika, Umwelt, Forensik und Chemikalien verwendet.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen FPLC und HPLC?
- FPLC und HPLC sind Arten von Flüssigchromatographie.
- Beide werden verwendet, um biologische Proben zu trennen und zu identifizieren.
- Sie haben eine flüssige mobile Phase und eine solide stationäre Phase.
- Beide Techniken verwenden eine Spalte, um die Probe durchzuführen.
- Diese Techniken verwenden Pumpen, Detektoren, Ventile und Software zur Abtrennung und Erkennung von Proben.
Was ist der Unterschied zwischen FPLC und HPLC?
FPLC ist eine Art Flüssigchromatographie, mit der große Biomoleküle wie Proteine, Nukleotide und Peptide reinigten. HPLC ist eine Art Flüssigchromatographie, mit der kleine Molekulargewichtsverbindungen getrennt werden. Dies ist also der Schlüsselunterschied zwischen FPLC und HPLC. Darüber hinaus verwendet FPLC pH- und Leitfähigkeitsmonitore und Wells als Fraktionskollektoren. Im Gegensatz dazu verwendet HPLC PH- und Leitfähigkeitsmonitore und Fraktionskollektoren nicht.
Die folgende Infografik listet mehr Unterschiede zwischen FPLC und HPLC in tabellarischer Form auf.
Zusammenfassung -FPLC vs HPLC
Chromatographie ist eine Laboranalysetechnik, die zur Trennung von Komponenten von einer Mischung verwendet wird. Es ist in verschiedene Typen wie Säulenchromatographie, Gaschromatographie, Flüssigchromatographie, Ionenaustauschchromatographie usw. unterteilt. FPLC und HPLC sind zwei Arten von Flüssigchromatographie -Techniken. FPLC ist eine Art Flüssigchromatographie, mit der große Biomoleküle wie Proteine, Nukleotide und Peptide reinigten. Andererseits ist HPLC eine Art Flüssigchromatographie, die zum Trennen von Verbindungen kleiner Molekulargewicht verwendet wird. Dies ist also die Zusammenfassung des Unterschieds zwischen FPLC und HPLC.
Referenz:
1. „Schnelle Proteinflüssigkeitschromatographie.”News-Medical.Netz, 25. Januar. 2019.
2. „Was ist HPLC/Hochleistungs-Flüssigchromatographie?Laborausbildung, 11. Mai 2021.
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1. "Chromatographiegeräte" von GIAC83 - eigene Arbeit (CC BY -SA 2.5) über Commons Wikimedia
2. "HPLC" von Sam.F. - Eigene Arbeit (CC BY-SA 3.0) über Commons Wikimedia
