Was ist der Unterschied zwischen Mikronukleus- und Komet -Assay

Der Schlüsselunterschied Zwischen Mikronukleus- und Kometstest ist, dass der Mikronukleus -Assay wichtig ist, um den chromosomalen Schaden als Folge der Mutagenexposition zu überprüfen, während der Komet -Assay wichtig ist, um primäre DNA -Schäden in einzelnen Zellen nachzuweisen.

Genotoxizitätstests tragen dazu bei, die Möglichkeiten von Mutationen und chromosomalen Anomalien zu bewerten. Genotoxine umfassen chemische Substanzen und Strahlung. Karzinogene, Mutagene und Teratogene sind die Hauptkategorien von Genotoxinen. Sie verursachen verschiedene Schäden wie Punktmutationen, Deletionen, Einzel- und Doppelstrangbrüche, chromosomale Aberrationen, Mikronuklei-Formationen, DNA-Reparaturen und Zellzykluswechselwirkungen. Solche Bedingungen können zu einer Vielzahl von Krankheiten führen, und Genotoxizitätstests verhindern die möglichen Schäden durch diese Bedingungen. Mikronukleus -Assay und Comet -Assay sind zwei Techniken unter Genotoxizitätstests.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist Mikronukleus -Assay
3. Was ist Comet Assay
4. Ähnlichkeiten -Mikronukleus- und Komet -Assay
5. Mikronukleus vs Comet -Assay in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung -Mikronukleus vs Comet -Assay

Was ist Mikronukleus -Assay?

Der Mikronukleus -Assay ist ein Assay zur Beurteilung des chromosomalen Schadens infolge der Mutagenexposition. Es ist wichtig, Chemikalien zu überprüfen, die Spindelbildung und Mikronuklei verursachen. Ein Mikronukleus -Assay liefert Informationen über die Stabilität von Chemikalien, wenn sie die Chromosomenstruktur und -funktion beeinträchtigen. Viele Karzinogene testen positiv in Mikronukleus -Assays. Der Assay -Prozess beinhaltet eine chemische Behandlung und die Messung der Häufigkeit von mikronukleierten Zellen. Wenn die Anzahl der Mikronuklei -Zellen abnormal ansteigt, kommt es zu dem Schluss, dass die Chemikalie eine chromosomale Schädigung induziert.

Ein Mikronukleus -Assay wird normalerweise zum aktiv teilenden Zellen durchgeführt. Daher sind Erythrozyten und Knochenmarkstammzellen, die durch Zellabteilungen produziert werden, ideale Kandidaten für solche Assays. Sie erleben einen konstanten und schnellen Umsatz. Da Erythrozyten keine echten Kerne haben, macht es am Ende des Assays mikronukleierte Zellen sichtbarer.

Abbildung 01: Mikronukleus -Assay -Beobachtung

Mikronukleus -Assays sind wirtschaftlich, schneller, bequem und erfordern weniger Fähigkeiten, um die Durchführung zu erhalten. Sie reflektieren chromosomale Aberrationen schnell zuverlässig und sind äußerst nützlich, um die chromosomalen Schäden schnell zu bewerten. Eine spezielle und vielseitige Art von Mikronukleus -Assay ist der Cytokinese -Block -Mikronukleus -Cytom (CBMNCYT) -Assay. Es ist der bevorzugte Assay zur Messung chromosomaler Schäden und Instabilität in Zellen. Das Hauptproblem bei der Verwendung des Mikronukleus -Assays besteht jedoch darin, dass sie verschiedene Arten von Chromosomenaberrationen nicht bestimmen kann, und der Assay hat einen Einfluss auf die mitotische Rate und den Anteil des Zelltod.

Was ist Comet Assay?

Der Comet -Assay, der auch als Einzelgelelektrophorese -Assay bezeichnet wird, ist eine einfache und empfindliche Technik, um DNA -Schäden nachzuweisen. Es misst die DNA -Bruchs in eukaryotischen Zellen und ist eine Standardtechnik für Biomonitoring- und Genotoxizitätstests.

Der Komet -Assay ist an der Einkapselung von Zellen in niedrigen Schmelzpunkt -Agarose -Suspensionen, der Lyse von Zellen unter neutralen oder alkalischen Bedingungen und der Elektrophorese von suspendierten lysedischen Zellen beteiligt. Während des Einkapselungsprozesses werden die Zellen in geschmolzenem niedrigem Schmelzpunkt -Agarose suspendiert, und die Agarose bildet eine Matrix von Kohlenhydratfasern, um sie an Ort und Stelle zu verankern. Agarose ist osmotisch neutral; Daher ermöglicht es den Lösungen, durch das Gel einzudringen und die Zellen zu beeinflussen, ohne sie zu stören und zu verschieben. Die Lyselösung ist eine hoch konzentrierte wässrige Salzlösung und ein Reinigungsmittel. Dieses Salz stört Proteine ​​und die Bindungsmuster in der Zelle, während der RNA -Gehalt der Zelle stört. Die Zellen zerstören, und alle Proteine, RNA, cytoplasmatische und nukleoplasmatische Bestandteile, stören und diffundieren in die Agarosematrix, wodurch die DNA verließ.

Abbildung 02: Comet -Assay

Die Elektrophorese-Lösung ist eine alkalische Lösung, bei der die DNA-Doppelhelix-Denataturen und das Nukleoid einssträngig werden. Während dieses Prozesses wird ein elektrisches Feld angewendet, um die Bilder zu analysieren. Die Bildanalyse misst die Gesamtintensität der Fluoreszenz für DNA und Nukleoid und vergleicht die beiden. Die Gesamtstruktur ähnelt einem Kometen mit einem kreisförmigen Kopf, der der verbleibenden unbeschädigten DNA und einem Schwanz für die beschädigte DNA entspricht. Je heller und länger der Schwanz aufgrund stärkerer Signale ist, desto höher ist der Schadensniveau.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen Mikronukleus- und Kometstest?

• Mikronukleus und der Comet -Assay sind wirtschaftlich, schneller, bequem und benötigen weniger Fähigkeiten.
• Sie werden hauptsächlich auf DNA durchgeführt.
• Beide Assays helfen bei der Beurteilung von Mutationen und chromosomalen Anomalien.
• Darüber hinaus verwenden beide Techniken Chemikalien, um das Verfahren durchzuführen.

Was ist der Unterschied zwischen Mikronukleus- und Komet -Assay?

Der Mikronukleus -Assay ist wichtig für die Überprüfung der chromosomalen Schäden infolge der Mutagenexposition, während der Kometenassay wichtig ist, um primäre DNA -Schäden in einzelnen Zellen nachzuweisen. Dies ist daher der wichtigste Unterschied zwischen Mikronukleus und Kometen -Assay. Außerdem ist der Mikronukleus -Assay gut etabliert, um Klastogenität und Aneugenität nachzuweisen. Der Comet -Assay wird als Genotoxizitätstest verwendet, um primäre DNA -Schäden in Zellen nachzuweisen. Darüber hinaus liefert ein Mikronukleus -Assay Informationen über die Stabilität von Chemikalien, während ein Comet -Assay eine einzelne Zellgelelektrophorese ist.

Die folgende Infografik zeigt die Unterschiede zwischen Mikronukleus- und Komet -Assay in tabellarischer Form für Seite für Seitenvergleich.

Zusammenfassung -Mikronukleus vs Comet -Assay

Genotoxizitätstests tragen dazu bei, die Möglichkeiten von Mutationen und chromosomalen Anomalien zu bewerten. Mikronukleus -Assay und Comet -Assay sind zwei Techniken unter Genotoxizitätstests. Der Mikronukleus -Assay bewertet den chromosomalen Schaden als Folge der Mutagenexposition. Der Comet -Assay ist eine einfache und empfindliche Technik, um DNA -Schäden zu erkennen. Dies ist also der wichtigste Unterschied zwischen Mikronukleus und Kometenassay. Der Mikronukleus -Assay ist wichtig beim Screening auf Chemikalien, die Spindelbildung und Mikronuklei verursachen. Der Comet -Assay ist an der Einkapselung von Zellen in niedrigen Schmelzpunkt -Agarose -Suspensionen, der Lyse von Zellen unter neutralen oder alkalischen Bedingungen und der Elektrophorese von suspendierten lysierten Zellen beteiligt.

Referenz:

1. „Comet -Assay.”Sigmaaldrich.
2. „Mikronukleus -Test.”Ein Überblick | Sciencedirect -Themen.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Maskierung zur automatischen Erkennung von Mikronuklei" durch Genomicintegrity - eigene Arbeit (CC von 4).0) über Commons Wikimedia
2. "Casplabapp" von Koncak - eigene Arbeit (CC BY -SA 3.0) über Commons Wikimedia