Was ist der Unterschied zwischen T4 -DNA -Ligase und E coli -DNA -Ligase

Der Schlüsselunterschied zwischen T4 -DNA -Ligase und e. Coli -DNA -Ligase ist, dass die T4 -DNA -Ligase ein Enzym ist, das aus Bakteriophagen T4 isoliert wird, während e. Die Coli -DNA -Ligase ist ein Enzym, das aus dem Bakterium isoliert wird E. coli.

DNA -Ligase ist eine spezifische Art von Enzym, die das Verbinden von DNA -Strängen durch die Bildung einer Phosphodiesterbindung miteinander erleichtert. Es spielt eine wichtige Rolle, indem es einzelne Strangbrüche und doppelte Strangbrüche in der DNA lebender Organismen repariert. Darüber hinaus wird die DNA -Ligase sowohl in der DNA -Reparatur als auch in der DNA -Replikation verwendet. Abgesehen von den oben genannten Verwendungen hat die DNA -Ligase auch in molekularen Biologieversuche wie rekombinant. T4 -DNA -Ligase und E. coli DNA -Ligase sind zwei Arten von DNA -Ligase -Enzymen.

INHALT

1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist T4 -DNA -Ligase  
3. Was ist E coli -DNA -Ligase
4. Ähnlichkeiten -T4 -DNA -Ligase und E coli -DNA -Ligase
5. T4 -DNA -Ligase gegen E Coli -DNA -Ligase in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung -T4 -DNA -Ligase gegen E Coli -DNA -Ligase

Was ist T4 -DNA -Ligase?

T4 -Ligase ist ein DNA -Verbindungsenzym, das aus Bakteriophagen T4 isoliert wird. T4 -Bakteriophagen ist ein Virus, das infiziert Escherichia coli. Das T4 -Ligase -Enzym ist die am häufigsten verwendete DNA -Ligase in der molekularen biologischen Laborforschung. Normalerweise katalysiert die T4-Ligase die Verbindung von zwei kohäsiven oder stumpfdeendeten Strängen von Doppelstrang-DNA zwischen dem 5'. Es kann auch die Verbindung von RNA entweder zu einem DNA- oder RNA -Strang in einem Duplexmolekül katalysieren. Dieses Enzym wird jedoch keine einzelsträngigen Nukleinsäuren verbinden. Darüber hinaus kann es auch stumpfdeendete DNA mit einer viel größeren Effizienz als E. coli DNA -Ligase.

Abbildung 01: T4 -DNA -Ligase

Dieses Enzym benötigt ATP als Cofaktor. Einige Forschungsexperimente für Gentechnik haben bereits aktivere DNA-Ligase-Enzyme als Wildtyp-T4-DNA-Ligase produziert. In einem der Ansätze erstellten sie ein Fusion-Enzym-Molekül. Dieses neue T4-Ligase-Enzym war 160% in stumpfen Ligationen für Klonierungszwecke aktiver als Wildtyp-T4-DNA-Ligase. Darüber hinaus beträgt die optimale Temperatur für T4 -DNA -Ligase die Ligationsreaktion genauer 16 ° C.

Was ist E coli -DNA -Ligase?

E. Die Coli -DNA -Ligase ist ein Enzym, das isoliert ist E. coli Bakterien. Das Gen, das für die Herstellung verantwortlich ist E. coli DNA -Ligase ist das LIG -Gen. Der E. coli DNA, Ligase sowie die meisten Prokaryoten -DNA -Ligasen, verwenden Energie, die von NAD (Nikotinamid -Adenin -Dinukleotid) gewonnen wird, um die Phosphodiesterbindung zu erzeugen.

Abbildung 02: e. Coli -DNA -Ligase

E. coli DNA-Ligase ist ein Ligationsenzym, das DNA-Fragmente beitreten kann, indem sie die Bildung von Phosphodiesterbindungen zwischen doppelsträngigen DNA-Fragmenten mit 5'. Darüber hinaus löst es nur unter besonderen Bedingungen wie molekularer Füllkörper mit Polyethylenglykol nicht, außer unter besonderen Bedingungen, außerhalb von DNA. Es kann auch keine RNA mit der DNA beitreten. Darüber hinaus die Aktivität von E. coli Die DNA -Ligase kann durch das Vorhandensein von DNA -Polymerase 1 an der richtigen Konzentration verstärkt werden. Wenn die Konzentration des DNA -Polymerase -1 -Enzyms jedoch höher ist, hat es nachteilige Auswirkungen auf E. coli DNA -Ligaseaktivität.

Was sind die Ähnlichkeiten zwischen T4 -DNA -Ligase und E coli -DNA -Ligase?

• T4 -DNA -Ligase und E coli DNA -Ligase sind zwei Arten von DNA -Ligase -Enzymen.
• Beide sind Proteine ​​aus Aminosäuren.
• Diese Enzyme katalysieren die Bildung einer Phosphodiesterbindung zwischeneinander gegenüber 5 'Phosphat und 3' Hydroxyltermini in Duplex -DNA.
• Sie haben umfangreiche Anwendungen in molekularen Biologieexperimenten wie rekombinanter DNA -Technologie.

Was ist der Unterschied zwischen T4 -DNA -Ligase und E coli -DNA -Ligase?

Die T4 -DNA -Ligase ist ein Enzym, das während der Bakteriophagen T4 isoliert wird E. coli DNA -Ligase ist ein Enzym, das isoliert ist E. coli Bakterien. Somit ist dies der Schlüsselunterschied zwischen T4 -DNA -Ligase und E. coli DNA -Ligase. Darüber hinaus ist die Energiequelle für die T4 -DNA -Ligase ATP. Andererseits die Energiequelle für E. coli DNA -Ligase ist nad.

Die folgende Infografik zeigt die Unterschiede zwischen T4 -DNA -Ligase und E coli DNA -Ligase in tabellarischer Form für Seite an Seitenvergleich.

Zusammenfassung -T4 -DNA -Ligase gegen E Coli -DNA -Ligase

T4 -DNA -Ligase und E. coli DNA -Ligase sind zwei Enzyme, die die Bildung einer Phosphodiesterbindung zwischeneinander miteinander 5' -Phosphat und 3 'Hydroxyltermini in Duplex -DNA katalysieren. T4 -Ligase ist ein Enzym, das während der Bakteriophagen T4 isoliert wird E. coli DNA -Ligase ist ein Enzym, das isoliert ist E. coli Bakterien. Dies ist also der Schlüsselunterschied zwischen T4 -DNA -Ligase und E coli DNA -Ligase.

Referenz:

1. „T4 -DNA -Ligase.New England Biolabs: Reagenzien für die Biowissenschaftsbranche.
2. „E. Coli -DNA -Ligase.New England Biolabs: Reagenzien für die Biowissenschaftsbranche.

Bild mit freundlicher Genehmigung:

1. "Site Directed Mutatgenesis" von MJeltsch - eigene Arbeit (CC BY -SA 4.0) über Commons Wikimedia
2. "DNA -Mismatchreparatur" von Kenji Fukui - NCBI (CC von 3.0) über Commons Wikimedia