Unterschied zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz
Der Schlüsselunterschied Zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz befindet sich die Direkte Immunfluoreszenz verwendet einen einzelnen Antikörper, der gegen das Ziel von Interesse wirkt, während die indirekte Immunfluoreszenz zwei Antikörper verwendet, um das Interessesziel zu kennzeichnen.
Immunfluoreszenz oder Zellbildgebung ist eine Technik, mit der ein bestimmtes Zielantigen mit einem Fluorophor kennzeichnet wird. Hier ist das Fluorophor eine fluoreszierende chemische Verbindung, die das Licht auf Lichtanregung wieder aufnehmen kann. Wenn ein Fluorophor mit dem Zielantigen bindet, ermöglicht es den Nachweis des Zielmoleküls in der Probe. Um es weiter zu beschreiben, kann ein Antigen mit einem bestimmten Antikörper bindet, es kann mit Fluorophoren konjugiert werden. Daher ist es leicht, das Vorhandensein des Zielantigens in der Probe bei der Beobachtung des Fluoreszenzmikroskops nachzuweisen.
Außerdem gibt es zwei Arten von Immunfluoreszenz; direkte und indirekte Immunfluoreszenz. Der Unterschied zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz liegt hauptsächlich in der Anzahl der verwendeten Antikörper und der Fluorophor -Konjugation. Das heißt, in direkter Immunfluoreszenz konjugiert das Fluorophor direkt zum primären Antikörper, während im indirekten Immunfluoreszenz das Fluorophor mit dem sekundären Antikörper konjugiert.
INHALT
1. Überblick und wichtiger Unterschied
2. Was ist direkte Immunfluoreszenz
3. Was ist indirekte Immunfluoreszenz
4. Ähnlichkeiten zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz
5. Seite für Seitenvergleich - Direkt gegen indirekte Immunfluoreszenz in tabellarischer Form
6. Zusammenfassung
Was ist direkte Immunfluoreszenz?
Immunfluoreszenz verwendet Antikörper, um spezifische Zielantigene nachzuweisen. Direkte Immunfluoreszenz ist eine der beiden Arten von Immunfluoreszenz. In direkter Immunfluoreszenz beinhaltet ein einzelner Antikörper (primärer Antikörper) und das Fluorophor konjugiert direkt mit dem primären Antikörper. Nach der Bindung des Antikörpers mit dem Zielantigen emittiert Fluorophor die Fluoreszenz, die durch ein Fluoreszenzmikroskop nachgewiesen werden kann.
Abbildung 01: direkte Immunfluoreszenz
Direkte Immunfluoreszenz ist jedoch eine teure Methode, da die primären konjugierten Antikörper im Vergleich zu den sekundären Antikörpern kostspielig sind. Trotzdem handelt es sich nicht um einen zusätzlichen Schritt, daher eine kürzere Technik. Darüber hinaus sind unspezifische Bindungen bei direkter Immunfluoreszenz verringert. Daher ist die Kreuzreaktivität der Arten niedrig. Bei der Erkennung ist die Empfindlichkeit der direkten Immunfluoreszenz im Vergleich zum indirekten Immunfluoreszenz schwach .
Was ist indirekte Immunfluoreszenz?
Die indirekte Immunfluoreszenz ist die zweite Art der Immunfluoreszenz, die zwei Arten von Antikörpern wie primäre und sekundäre Antikörper bei der Markierung des Zielantigens umfasst. Bei dieser Methode konjugiert der Fluorophor mit dem sekundären Antikörper. Daher beinhaltet diese Technik einen zusätzlichen Schritt.
Abbildung 02: Immunfluoreszenz
Die Empfindlichkeit ist jedoch in dieser Methode hoch, da mehrere Fluorophore an sekundäre Antikörper konjugiert werden können und die Nachweis erleichtert werden. Darüber hinaus ist die indirekte Immunfluoreszenz günstiger, da die Konjugation sekundärer Antikörper günstiger und einfacher ist. Im Vergleich zur direkten Immunfluoreszenz ist die Kreuzreaktivität der Spezies in der indirekten Methode hoch.
Was sind die Ähnlichkeiten zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz?
- Sie sind zwei Arten von Immunfluoreszenztechniken.
- Primäre Antikörper und Fluorophor beinhalten in beiden Methoden.
- Auch die Antigen-Antikörper-Reaktion tritt in beiden Methoden auf.
- Darüber hinaus verwenden sowohl direkte als auch indirekte Immunfluoreszenz ein Fluoreszenzmikroskop zum Nachweis von Antigen.
Was ist der Unterschied zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz?
Immunfluoreszenz kann direkt oder indirekt auf der Grundlage der Fluorophor -Konjugation mit den verwendeten Antikörpern sein. In direkter Immunfluoreszenz konjugiert der Fluorophor mit dem primären Antikörper, dem einzelnen Antikörper, der an dieser Technik beinhaltet. Im Gegensatz dazu konjugiert im indirekten Immunfluoreszenz der Fluorophor mit dem sekundären Antikörper, der eine der beiden Arten von Antikörpern ist, die an der Technik beteiligt sind. Der Hauptunterschied zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz ist daher der Antikörpertyp, der mit dem Fluorophor konjugiert.
Die folgende Infografik liefert einen Vergleich des Unterschieds zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz.
Zusammenfassung -Direkt gegen indirekte Immunfluoreszenz
Immunfluoreszenz ist eine Technik, mit der das Vorhandensein spezifischer Antigene in einer Probe nachgewiesen wird. Diese Technik verwendet bestimmte Antikörper. Daher konjugieren die Antikörper mit Fluorophoren, um sie unter Verwendung eines fluoreszierenden Mikroskops zu erkennen. Darüber hinaus gibt es zwei Arten von Immunfluoreszenz, nämlich direkte und indirekte Immunfluoreszenz. Direkte Immunfluoreszenz beinhaltet einen einzelnen Antikörper und einen Fluorophor. Die indirekte Immunfluoreszenz umfasst zwei Antikörper; Primär- und Sekundär- und Fluorophor konjugiert an den sekundären Antikörper. Da mehrere sekundäre Antikörper mit einem primären Antikörper binden und mehrere Fluorophore mit sekundären Antikörpern konjugieren können, ist die indirekte Immunfluoreszenz eine empfindlichere Methode als die direkte Methode. Darüber hinaus ist die indirekte Methode günstiger als die direkte Methode. Dies ist daher der Unterschied zwischen direkter und indirekter Immunfluoreszenz.
Referenz:
1.„Immunfluoreszenz.”Wikipedia, Wikimedia Foundation, 19. August. 2018. Hier verfügbar
Bild mit freundlicher Genehmigung:
1."HSP if iga" von Emmanuelm bei en.Wikipedia (CC von 3.0) über Commons Wikimedia
2.”Immunfluoreszenz” von Westhayl618 - eigene Arbeit (CC BY -SA 4).0) über Commons Wikimedia
