Unterschied zwischen Transformation und Transfektion
Transformation gegen Transfektion
Transformation und Transfektion sind zwei einfache Techniken, mit denen ein fremdes Gen in eine Wirtszelle eingeführt wird. Diese Techniken hängen jedoch von der Art der Host- oder Vektorsysteme ab.
Was ist Zelltransformation?
Transformation ist die Technik, die zur Einführung von Genen in Hefe- und Bakterienzellen eingesetzt wird. Diese Technik verursacht normalerweise vererbbare Veränderungen in Genen, und daher ist die Expression des Gens dauerhaft. Die bakterielle Transformation wurde erstmals 1928 von Frederick Griffith eingeführt. Dann wurde diese Technik in den frühen 1970er Jahren in verwendet E. coli. Während des Transformationsprozesses von E. coli, Die Zellen sind in eiskaltes CaCl-Lösung eingeweicht2. Dieser Schritt macht E.coli Zellen kompetent. Danach werden die kompetenten Zellen mit der Plasmid-DNA gemischt und 20-30 Minuten auf Eis inkubiert. Dann wird ein kurzer Wärmeschock gegeben, um die DNA -Übertragung in die Zelle zu ermöglichen. Schließlich werden die Zellen in eine Nährstoffbrühe platziert und 60-90 Minuten bei 37 ° C inkubiert, um die Plasmide festzulegen. Sobald diese Schritte erfolgreich abgeschlossen sind. Da die Transformation als ineffiziente Technik angesehen wird, kann sie möglicherweise nicht für die Herstellung von Klonbanken verwendet werden.
Was ist Zelltransfektion?
Die Transfektion ist eine Methode zur Einführung eines fremden Gens in der Regel in Säugetierzellen. Es gibt zwei Transfektionsmethoden; nämlich transiente Transfektion und stabile Transfektion. In der vorübergehenden Transfektion steht die Genexpression für eine begrenzte Zeit zur Verfügung. Somit verursacht die Veränderung des Gens eine vorübergehende Expression. Diese Transfektionsmethode ist einfach und schnell; Daher kann es routinemäßig verwendet werden. Ein Nachteil der transienten Transfektion ist die Schwierigkeit, sich für große Proteinsynthesesysteme anzuwenden.
Während der stabilen Transfektion ist ein Zielgen Gen in das Genom der Wirtszelle integriert, und somit ist die Genexpression im Gegensatz zur transienten Transfektion dauerhaft.
Was ist der Unterschied zwischen Transformation und Transfektion?
• Die Transformation ist die Einführung eines Gens in eine prokaryotische Zelle (Bakterien und Hefe), während die Transfektion normalerweise als Einführung eines Gens in eine Säugetierzelle bezeichnet wird.
• Die Transformation führt zu einer vererbbaren Veränderung in Genen, während die Transfektion entweder zu einer vorübergehenden Expression oder zu dauerhaften Veränderungen der Gene führen kann.
